Avidity,LLC于1996年由Millard Cull,Larry Lansing,Ron Gill博士和Mark Seville博士創(chuàng)立,基于生物素對(duì)抗生物素蛋白或鏈霉親和素的非凡親和力開發(fā)肽標(biāo)簽和分子生物學(xué)產(chǎn)品。在Affymax擔(dān)任研究人員的同時(shí),Millard參與了AviTag技術(shù)的發(fā)現(xiàn),發(fā)現(xiàn)了其商業(yè)潛力,并獲得了Affymax的*權(quán)利。他開始使用Avidity作為試劑公司,將AviTag技術(shù)的使用權(quán)授予其他公司,并銷售與該技術(shù)一起使用的產(chǎn)品。
帶有AviTag標(biāo)簽的人類全長(zhǎng)ORF克隆已經(jīng)被構(gòu)建在多種T7和CMV啟動(dòng)子表達(dá)系統(tǒng),可以立即購買使用。AviTag標(biāo)簽蛋白可以被體內(nèi)或體外的生物素連接酶生物素化,而且抗生物素蛋白或鏈霉親和素可以專一地與生物素結(jié)合,正基于這兩個(gè)反應(yīng),AviTag?技術(shù)可以應(yīng)用于蛋白的固定,純化和顯影。 雖然Avidity是一個(gè)小公司,科學(xué)帶來的好處及其AviTag已得到認(rèn)可。目前, AviTag技術(shù)已經(jīng)在22個(gè)國(guó)家的世界制藥公司和研究人員中得到認(rèn)可。
隨著Avidity成熟,該公司正在擴(kuò)大其科學(xué)視野,并調(diào)查使用生物發(fā)光 - 如在深海生物體中發(fā)現(xiàn) - 使其產(chǎn)品對(duì)科學(xué)界更有用。Prolume有限公司的Bruce Bryan博士于2004年接觸AvidTag與Prolume的高斯熒光素酶和綠色熒光蛋白(GFP)結(jié)合使用。*款高斯AviTag產(chǎn)品于2007年11月發(fā)布。
此外,Avidity正在與幾家公司合作,通過將非常靈敏的光學(xué)傳感器與基于熒光素酶的測(cè)定相結(jié)合,開發(fā)出新一代高度移動(dòng),簡(jiǎn)單,廉價(jià)且功能強(qiáng)大的診斷功能。結(jié)合BP蛋白質(zhì)組學(xué)(新型測(cè)定生物化學(xué)),Prolume(發(fā)光/熒光分子和硬件創(chuàng)新專家),黑森林工程(光學(xué)器件工程),Avidity正在開發(fā)用于檢測(cè)和鑒定的蛋白質(zhì)和DNA微陣列生物芯片和生物傳感器的疾病病原體和復(fù)合高通量篩選(HTS)。
BirA酶(生物素連接酶)
貨號(hào):BirA500
品名:BirA biotin-protein ligase standard reaction kit(BirA生物素蛋白連接酶標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)試劑盒)
生物素連接酶(Biotin Protein Ligase)用于催化生物素化反應(yīng),將生物素連接到特定的蛋白上。同時(shí)它也是生物素誘導(dǎo)抑制劑,常見類型包括大腸桿菌中的BirA。BirA已經(jīng)被廣泛應(yīng)用到各類實(shí)驗(yàn)中,包括真核細(xì)胞實(shí)驗(yàn)。
BirA受體-多肽系統(tǒng)在生物素化多肽底物時(shí),具有超高的特異性。BirA可以識(shí)別一段多肽序列(生物素受體標(biāo)簽BAT)。當(dāng)融合BAT的蛋白和BirA共表達(dá)時(shí),BAT序列可以被有效生物素化。被生物素化的蛋白質(zhì)可以通過與之有高親和力的抗生物素蛋白或者鏈霉親和素進(jìn)行一步純化。
BirA催化的生物素化過程一般包含兩個(gè)步驟:1. 將生物素和ATP反應(yīng)生成biotinoyl-5‘-AMP, 此過程將活化的生物素被固定在BirA的活性位點(diǎn)上。2. 將活化的生物素通過反應(yīng)偶聯(lián)到BAT序列的特定賴氨酸殘基上 。
一、BirA酶產(chǎn)品性質(zhì):
貨號(hào) | BirA500 | 濃度 | 1.0mg/ml |
來源: | E. coli. | 酶活性: | 5000 Units/µg |
Mol wt | 33.5kDa | 規(guī)格 | 20ul |
儲(chǔ)存緩沖液 | 50mM 咪唑(pH 6.8), 50mM NaCl, 10% 甘油, 5mM (DTT) | ||
純度: | > 99%通過考馬斯亮藍(lán)染色 | ||
儲(chǔ)存條件:
| 于干冰中運(yùn)送,到達(dá)后要立刻置于-80°C中。解凍后分裝,近期使用可保存于4°C,長(zhǎng)時(shí)間的使用需保存于在-80°C. |
二、典型的BirA動(dòng)力學(xué)活性測(cè)定
三、BirA酶的12%聚丙烯酰胺SDS-PAGE凝膠圖譜*
https://www.avidity。。com/avitag/bira-500-bira-biotin-protein-ligase-standard-reaction-kit
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