ALSTEM慢病毒的濃縮與純化方法
慢病毒沉淀溶液是針對(duì)慢病毒顆粒沉淀而優(yōu)化的聚合物的混合物。它為濃縮慢病毒顆粒提供了一種簡(jiǎn)單,快速和的方法。在簡(jiǎn)單的方案中,您只需將慢病毒上清液與慢病毒沉淀溶液混合,孵育一小段時(shí)間,然后在標(biāo)準(zhǔn)離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)混合物。您可以將慢病毒滴度提高至4倍,并且無(wú)需超速離心即可獲得的回收率。Lentivirus沉淀解決方案是一個(gè)5x解決方案。
1.將含有慢病毒顆粒的培養(yǎng)基從平板轉(zhuǎn)移到無(wú)菌容器中,并以300×g離心培養(yǎng)基10分鐘以除去細(xì)胞碎片。
2.通過(guò)0.45μm過(guò)濾器過(guò)濾上清液。
3.將過(guò)濾的上清液轉(zhuǎn)移到無(wú)菌容器中,并向每4體積的含有慢病毒的上清液中加入1體積的冷的慢病毒沉淀溶液(4℃)。(實(shí)施例:5ml慢病毒沉淀溶液,含20ml病毒上清液)。
4.充分混合并冷藏3小時(shí)至過(guò)夜。與Lentivirus沉淀溶液混合的含有慢病毒的上清液在4°C下可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)4天。
5.在4℃下以1500×g離心混合物30分鐘。離心后,慢病毒顆??稍谌萜鞯撞匡@示為米色或白色顆粒。
6.丟棄上清液。通過(guò)以1500×g離心5分鐘來(lái)旋轉(zhuǎn)殘留溶液。通過(guò)抽吸去除所有的液體痕跡,小心不要打擾顆粒中沉淀的慢病毒顆粒。
7.使用冷的無(wú)菌PBS或DMEM在4℃下以1/10至1/100的原始體積重懸慢病毒顆粒。
8.在低溫小瓶中分裝并儲(chǔ)存在-80°C直至準(zhǔn)備使用。
ALSTEM是一家位于灣區(qū)的早期生物技術(shù)公司,擁有快速擴(kuò)展的產(chǎn)品和服務(wù)組合,為生物制藥和學(xué)術(shù)機(jī)構(gòu)提供服務(wù)。受到加利福尼亞干細(xì)胞研究承諾的啟發(fā),ALSTEM于2012年由具有iPS細(xì)胞重編程和基因組編輯技術(shù)專業(yè)知識(shí)的科學(xué)家創(chuàng)立。
描述
慢病毒沉淀溶液是為慢病毒顆粒沉淀而優(yōu)化的聚合物混合物。它為濃縮慢病毒顆粒提供了一種簡(jiǎn)單,快速和的方法。在這個(gè)簡(jiǎn)單的方案中,您只需將慢病毒上清液與慢病毒沉淀溶液混合,孵育一小段時(shí)間,然后在標(biāo)準(zhǔn)離心機(jī)中旋轉(zhuǎn)混合物。您可以將慢病毒滴度提高至4倍,并且無(wú)需超速離心即可獲得的回收率。Lentivirus沉淀解決方案是一個(gè)5x解決方案。
特征
產(chǎn)品規(guī)格
產(chǎn)品名稱 | 慢病毒沉淀解決方案 |
目錄 # | VC100 |
尺寸 | 100毫升/ 250毫升/ 500毫升 |
運(yùn)輸 | 環(huán)境溫度 |
儲(chǔ)存和穩(wěn)定性 | 儲(chǔ)存在4°C。根據(jù)指示儲(chǔ)存,本產(chǎn)品可穩(wěn)定保存6個(gè)月 |
質(zhì)量控制 | 每批慢病毒沉淀溶液都經(jīng)過(guò)無(wú)菌和成功沉淀慢病毒顆粒的測(cè)試。 |
安全須知 | 對(duì)于含有BSL-2生物的所有材料,請(qǐng)遵循推薦的NIH指南。始終戴上手套,使用過(guò)濾的吸頭并在生物安全罩下工作。 |
限制使用 | 僅供研究使用。不得用于診斷或治療程序。 |
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