Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES) 位于加拿大安大略省的生命科學(xué)和蛋白質(zhì)化學(xué)領(lǐng)域高科技公司,推出新一代毛細(xì)管電泳儀系統(tǒng)-毛細(xì)管電泳等電聚集-全柱成像檢測技術(shù)(cIEF-WCID),*顛覆了傳統(tǒng)電泳技術(shù)在蛋白質(zhì)分析中的定義,通過cIEF-WCID技術(shù),復(fù)雜蛋白質(zhì)的分離和 pI點(diǎn)的測定變的異常輕松。成為蛋白質(zhì)藥物和抗體藥物研發(fā)和質(zhì)量控制、蛋白質(zhì)組學(xué)基礎(chǔ)研究和生物相互作用機(jī)制探索的強(qiáng)有力工具,同時(shí)也是食品安全中功能蛋白檢測、育種、奶制品、肉類等新的技術(shù)手段。
CEInfinite全柱成像等電聚焦毛細(xì)管電泳系統(tǒng)
CEInfinite毛細(xì)管電泳儀
信息量大,樣品在整個(gè)微分離通道中的分離得到全程檢測
CMOS照相機(jī)動(dòng)態(tài)檢測整個(gè)分離通道內(nèi)的各組分的動(dòng)態(tài)變化
分析時(shí)間縮短(10分鐘分析一個(gè)樣品),分析條件優(yōu)化變得簡單,分析方法的開發(fā)更快捷
CEInfinite毛細(xì)管電泳儀不需要樣品流動(dòng)化步驟,充分保持毛細(xì)管等電聚焦的高分離柱效和高分辨率
cEIF-WCID技術(shù)是蛋白質(zhì)基礎(chǔ)研究&生物醫(yī)藥研究的強(qiáng)有力工具
CEInfinite毛細(xì)管電泳儀是食品安全中功能蛋白檢測、奶制品、肉類等新的儀器
毛細(xì)管電泳儀給技術(shù)特點(diǎn)
1) 可以得到超高蛋白質(zhì)pI點(diǎn)的分辨率(△pI<0.01)
2) 超高通量的蛋白質(zhì)和抗體藥物分析(分析時(shí)間<10 min)
3) CEInfinite采用CMOS(Complementary Metal-Oxide-SemicondutorTranslator,互補(bǔ)性金屬氧化物半導(dǎo)體)作為成像檢測技術(shù),代替了傳統(tǒng)的CCD成像技術(shù),具有高速數(shù)據(jù)采集、寬線性范圍、綠色節(jié)能、超高檢測靈敏度和和儀器穩(wěn)定性等優(yōu)勢,這是工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的重要基礎(chǔ)
4) CEInfinite擁有超高穩(wěn)定性的自動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)(Alcotte719)和功能強(qiáng)大的操作和數(shù)據(jù)處理軟件,具有自動(dòng)數(shù)據(jù)匹配、pI值自動(dòng)軟件計(jì)算等功能
5) 目前世界上全的pI標(biāo)記物 (pI Marker): 30種pI Marker(pI point from 2.8 to11);完善的pH載體(carrier ampholytes):四種專有技術(shù)*的Aeslytes pH 3-10、 Aeslytes pH 2.5-5、 Aeslytes pH 5-8 和 Aeslytes pH 8-10.5,并可以根據(jù)客戶需要定制高分辨的pH范圍
6) 完善和多樣化的涂層毛細(xì)管Cartridge,極大提高了蛋白質(zhì)分離的靈敏度和分辨率
7) 儀器的安裝維護(hù)簡單、快捷
8) 完備的蛋白質(zhì)和抗體分析的解決方案和售前和售后團(tuán)隊(duì)
9) 體積小、重量輕(14公斤),適于現(xiàn)場便攜式分析;綠色低耗能(僅1瓦電耗)
作為世界上個(gè)也是僅有的制備型iCIEF解決方案,CEInfinite儀器系統(tǒng)是傳統(tǒng)成像毛細(xì)管等電聚焦(iCIEF)的創(chuàng)新。通過使用輔助設(shè)備和獲得專有技術(shù)的分離和分離濾芯,該系統(tǒng)能夠?qū)⒎蛛x的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)移到餾分收集器中,以進(jìn)行進(jìn)一步的質(zhì)譜分析(MS)或其他分析。在轉(zhuǎn)移過程中,分辨率不會(huì)改變。該實(shí)施方案是解決生物制藥應(yīng)用中用于微量制備,純化蛋白質(zhì)以及表征蛋白質(zhì)的挑戰(zhàn)的解決方案。
圖1. CEInfinite制備型iCIEF系統(tǒng)
使用生命系統(tǒng)制造蛋白質(zhì)生物制劑使它們?nèi)菀资艿椒g后修飾的影響。這些改變產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子量幾乎可以忽略不計(jì),但明顯改變了蛋白質(zhì)的等電荷。
iCIEF產(chǎn)生通過電荷分離的蛋白質(zhì)譜,從而可視化這些電荷變體相對(duì)于主要“靶”蛋白的存在。
隔離這些峰以進(jìn)行鑒定將為穩(wěn)定性研究以及配方和加工控制提供寶貴的信息。
CEInfinite制備型iCIEF儀器能夠在聚焦后逐個(gè)推出分離的蛋白質(zhì)峰。這是通過CEInfinite專有濾芯的創(chuàng)新設(shè)計(jì)實(shí)現(xiàn)的:大內(nèi)徑(ID)分離毛細(xì)管連接到較小的ID傳輸毛細(xì)管,具有接口,以大限度地減少分離后峰的重新混合。
下面在圖2中使用NISTmAb RM 8671演示了這種分離。
圖2.整個(gè)NISTmAb(黑色)的iCIEF和分離的電荷變體部分(顏色)
使用CEInsight CFR軟件,只需標(biāo)記每個(gè)感興趣峰的開始和結(jié)束,程序?qū)⒏嬖V您何時(shí)準(zhǔn)備好收集峰。
該技術(shù)還可以應(yīng)用于其他生物制劑,如酶,融合蛋白,抗體 - 藥物偶聯(lián)物(ADC)等。
使用mAb作為示例的這種分餾的潛在限制是,由于峰值動(dòng)員和收集的方向,更容易獲得比酸性峰更純的堿性峰的部分。為了解決這個(gè)問題,CEInfinite制備儀器提供了反轉(zhuǎn)聚焦極性的能力,允許更多的酸性峰位于儀器的收集餾分的一側(cè)。
MS偶聯(lián)是用于蛋白質(zhì)鑒定的強(qiáng)大的高通量表征解決方案。CEInfinite制備型iCIEF儀器的出口可以直接連接到質(zhì)譜儀,以提供用于表征的分級(jí)蛋白質(zhì)樣品(iCIEF-MS)。
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