Haematologic Technologies制造高質(zhì)量,血漿來源的凝血蛋白,抗體,因子缺陷型血漿和血液收集管,用于體外研究使用。我們確保產(chǎn)品制造流程確保質(zhì)量控制嚴格,努力成為先進凝血產(chǎn)品制造商。
上海起發(fā)7月新增HTI庫存產(chǎn)品,具體貨號如下:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 品牌 |
HCT-0020-100ug | Human α-thrombin | 100μg | Haematologic Technologies |
HCX-0050 | Human Factor X | 100µg | Haematologic Technologies |
HCT-0020 | Human α-thrombin | 1mg | Haematologic Technologies |
1、HCT-0020產(chǎn)品信息如下:效期至2020-7-12
Thrombin (alpha)
凝血酶原
的蛋白水解活化絲氨酸蛋白酶α-凝血酶通過酶原激活凝血酶原而產(chǎn)生。酶復(fù)合物凝血酶原酶催化凝血酶原中兩個肽鍵的蛋白水解,產(chǎn)生NH2末端衍生的F1.2區(qū)和異二聚體α-凝血酶。α-凝血酶由“A”鏈(Mr = 6000)組成,其通過單個二硫鍵與“B”鏈(Mr = 31,000)共價連接。
HCT-0020 人類α-凝血酶
尺寸 | 100微克,1毫克,10毫克(1毫克小瓶) |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲 | -20℃下 |
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純度 | 通過SDS-PAGE> 95% |
活動決定 | 纖維蛋白原凝固或顯色測定 |
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保質(zhì)期(妥善保存) | 12個月 |
α-凝血酶是通過酶原凝血酶原的蛋白水解活化產(chǎn)生的高度特異性絲氨酸蛋白酶(1)。在凝血過程中,凝血酶切割纖維蛋白原以形成纖維蛋白,導(dǎo)致凝血的終步驟,形成纖維蛋白凝塊。凝血酶還負責反應(yīng)激活因子V因子和因子VIII。據(jù)報道,凝血酶還激活因子XIII和血小板,并且還起血管收縮蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性以兩種方式停止:1)通過肝素輔助因子II或抗凝血酶III /肝素復(fù)合物抑制; 或2)與血栓調(diào)節(jié)蛋白形成復(fù)合物。凝血酶/血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物的形成導(dǎo)致凝血酶不能切割纖維蛋白原并激活因子V和VIII,
凝血酶是由NH2-末端“A”鏈(Mr = 6,000)和COOH-末端“B”鏈(Mr = 31,000)組成的雙鏈酶,其通過單個二硫鍵保持共價結(jié)合。人凝血酶比牛凝血酶短13個氨基酸,這是由于人蛋白上的凝血酶切割位點不存在于牛蛋白中。
凝血酶還用于細菌中表達的融合蛋白的位點特異性切割(9-11)。凝血酶敏感位點摻入目的重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用凝血酶切割,從表達的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。
使用如Nesheim等人所述的Lundblad程序(1)的修改,由純化的凝血酶原制備人,牛和小鼠凝血酶。(2)。凝血酶以50%(vol / vol)甘油/ H2O供應(yīng),應(yīng)儲存在-20oC。通過SDS-PAGE分析測定純度,并在凝血酶特異性凝固測定中測量活性,并與標準化的NIH凝血酶進行比較。凝血酶也可用活性位點用DFP,F(xiàn)PRck或生物素化的FPRck阻斷。
融合蛋白的切割
除了其在凝血研究中的廣泛應(yīng)用外,凝血酶還可用于融合蛋白的位點特異性切割。凝血酶敏感位點摻入目的重組蛋白和促進純化和/或表達的肽或蛋白質(zhì)之間。通過用凝血酶切割,從表達的雜交體釋放靶蛋白。然后可以通過親和層析容易地除去凝血酶。批次一致性確保每次都可重現(xiàn)的結(jié)果。對于涉及細胞培養(yǎng)的實驗,請與我們聯(lián)系,討論用于細胞培養(yǎng)的定制低內(nèi)毒素批次。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人β和γ凝血酶,每通道1μg |
緩沖 | MES |
標準 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脫氫酶(49 kDa),酒精脫氫酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6kDa),胰島素,B鏈(3kDa)。 |
屬性:
本土化 | 等離子體 | |||||||
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行動方式 | 絲氨酸蛋白酶,其裂解纖維蛋白原以形成纖維蛋白; 還負責激活蛋白C,血小板活化和反應(yīng)激活因子V,因子V和因子VIII | |||||||
分子量 | 36,700(3-6) | |||||||
消光系數(shù) |
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具體活動 | 大約3800 NIH單位/ mg | |||||||
等電點 | 7.0-7.6(人類)(3) | |||||||
結(jié)構(gòu)體 | 兩個亞基,大約先生= 6,000和31,000 | |||||||
碳水化合物百分比 | 約5% |
2、 HCX-0050產(chǎn)品信息如下:效期至2020-7-12
因子X
的結(jié)構(gòu)域表示因子X的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),其中:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區(qū)域,AP =在酶原轉(zhuǎn)化為釋放后釋放的活化肽?;钚越z氨酸蛋白酶,催化域=含有絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。箭頭表示在酶原激活期間被因子Xase蛋白水解切割的位點。
HCX-0050 人因X
尺寸 | 100微克,1毫克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲 | -20℃下 |
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純度 | 通過SDS-PAGE> 95% |
活動決定 | 凝血試驗 |
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保質(zhì)期(妥善保存) | 12個月 |
因子X是維生素K依賴性蛋白質(zhì)酶原,其在肝臟中合成并在血漿中循環(huán),作為通過二硫鍵連接的雙鏈分子(1,2)。在分泌到血漿中之前,翻譯后修飾產(chǎn)生11個γ-羧基谷氨酸(gla)殘基和單個b-羥基天冬氨酸殘基,它們位于NH2-末端輕鏈內(nèi)。輕鏈還含有兩個表皮生長因子(EGF)同源結(jié)構(gòu)域。因子X的COOH-末端重鏈含有大部分碳水化合物部分,以及潛在的絲氨酸蛋白酶結(jié)構(gòu)域。因子X的活化由內(nèi)因子Xase復(fù)合物(因子IXa,因子VIIIa,細胞表面和鈣離子)或外在因子Xase復(fù)合物(因子VIIa,組織因子,細胞表面和鈣離子)催化。通過復(fù)合物激活人因子X導(dǎo)致COOH-末端重鏈的Arg52-Ile53處的切割和隨后釋放的52氨基酸活化糖肽。因子Xa然后用作凝血酶原酶復(fù)合物的酶組分,其負責凝血酶原快速轉(zhuǎn)化為凝血酶。gla殘基使因子X / Xa以鈣依賴性方式結(jié)合磷脂(即細胞表面); 組裝凝血酶原酶復(fù)合物的要求。個EGF同源結(jié)構(gòu)域含有一個Ca2 +結(jié)合位點,它作為鉸鏈使EGF和GLA結(jié)構(gòu)域相互折疊(12)。該分子區(qū)域參與細胞結(jié)合域的識別。
通過常規(guī)技術(shù)(3)和免疫親和層析(4)的組合從新鮮冷凍的人血漿中分離人因子X. 除了標準的人因子X制劑之外,還可以使用Gla無結(jié)構(gòu)域人因子X. 使用Bajaj等人報道的方法的改進,從新鮮牛血漿中分離牛因子X. (5,6)。純化的酶原以50%(體積/體積)甘油/ H 2 O供應(yīng),應(yīng)儲存在-20℃。通過SDS-PAGE分析確定純度,并在因子X凝固測定中測量活性。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人因子X,每泳道1μg |
緩沖 | MOPS |
標準 | SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa的) |
屬性:
本土化 | 等離子體 | ||||||||
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血漿濃度 | 10μg/ ml | ||||||||
行動方式 | 酶原; 絲氨酸蛋白酶因子Xa的前體 | ||||||||
分子量 | 58,900(人類)(7) 55,100(牛)(8) | ||||||||
消光系數(shù) |
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等電點 | 4.9-5.2(人類)(9) 4.8-5.2(牛)(9) | ||||||||
結(jié)構(gòu)體 | 兩個亞基,Mr = 16,200和42,000(人),Mr = 16,500和39,300(牛),NH2末端gla結(jié)構(gòu)域和兩個EGF結(jié)構(gòu)域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 15%(人)(7) 10%(牛)(8) | ||||||||
翻譯后修改 | 11個gla殘基(7,8) 一個β-羥基天冬氨酸 |
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