上海起發(fā)現(xiàn)貨PROGEN PRHYPE說明書
在包裝常見的噬菌體展示噬菌粒時提供輔助噬菌體功能。通過pIII感染細(xì)菌。
貨號: PRHYPE
數(shù)量: 5 x 2 mL(lyoph。)
€504.00
純度 | PEG沉淀 |
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包裝單位 | 5x2 mL(lyoph。) |
背景:
從富含超噬菌體的文庫中分離重組抗體,蛋白質(zhì)或多肽的有效工具。
輔助噬菌體技術(shù)(“Hyperphage系統(tǒng)”)由Rondot等人開發(fā)。(Nature Biotechnology 19:75-81,2001)。Hyperphage系統(tǒng)允許通過增加每個噬菌體顆粒顯示的抗體數(shù)量(高達(dá)5對0.01)來改善噬菌體展示中的抗體呈遞,從而該系統(tǒng)在功能基因分析和蛋白質(zhì)組學(xué)領(lǐng)域提供了巨大的優(yōu)勢??梢杂蒙倭靠乖透蔬M行噬菌體的淘選。例如,通過在二維凝膠電泳后在蛋白質(zhì)斑點的印跡上平移超噬菌體包裝的文庫,可以改善通用文庫用于抗體分離的應(yīng)用。
可以通過淘選合成的膜結(jié)合肽表位來分析大量的開放閱讀框(ORF)。在癌癥研究中,超噬菌體包裝的文庫可以成為通過淘選細(xì)胞表面來發(fā)現(xiàn)新腫瘤標(biāo)志物的工具。
Hyperphages在pIII基因中攜帶缺失。它們由產(chǎn)生功能性pIII的大腸桿菌包裝細(xì)胞系產(chǎn)生,所述功能性pIII用于包裝具有pIII缺失的噬菌體基因組。產(chǎn)生的超噬菌體在其表面攜帶功能性pIII,但在其基因組中缺乏pIII基因。然后可以使用這些超噬菌體用噬菌粒文庫感染細(xì)菌。每個得到的展示噬菌體在其表面上攜帶幾個拷貝的抗體或肽,因此顯著提高了淘選效率。
通過使用hyperphage,抗原結(jié)合增強了兩個數(shù)量級。此外,由于攜帶抗體的質(zhì)粒(噬菌粒)編碼pIII和scFv片段之間的蛋白酶切割位點,可以通過蛋白酶處理洗脫超噬菌體包裝的文庫,允許洗脫高親和力的結(jié)合物,再加上恢復(fù)野生型感染性表型以優(yōu)化感興趣的抗體基因的恢復(fù)。
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