Advanced Biomatrix BM-5005說明書
貨號(hào):BM-5005-1000ML
品牌: Advanced Biomatrix
purecol®膠原蛋白被稱為所有膠原蛋白的純度(>99.9%膠原蛋白含量)、功能性和天然的膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)。pureCol®是從美國僅有控制的封閉獸群中分離出來的牛皮。先進(jìn)的Biomatrix的制造工藝符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),這些標(biāo)準(zhǔn)已被證明具有的批量一致性。
purecol®膠原蛋白約為97%的I型膠原蛋白,其余由III型膠原蛋白組成。它含有通過凝膠滲透色譜法測定的高單體含量。purecol®膠原蛋白的濃度約為3 mg/ml。每一特定批次的濃度在購買每種產(chǎn)品時(shí)可獲得的分析證書上提供。purecol®是溶于0.01 N HCI中的阿托洛膠原蛋白,因此,pH值約為2.0。PuReCl®膠原蛋白是理想的涂層表面,提供薄層培養(yǎng)細(xì)胞,或作為固體凝膠使用。
purecol®膠原蛋白以用戶友好的包裝提供使用和儲(chǔ)存。pureCol®經(jīng)過無菌過濾,作為現(xiàn)成的溶液提供。
Purecol膠原蛋白被稱為標(biāo)準(zhǔn)純度的膠原蛋白(>99.9%膠原蛋白含量),其功能可媲美大多數(shù)的原生膠原蛋白。Purecol提取于來自美國封閉式牛群的牛皮,先進(jìn)的生物生產(chǎn)過程符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),已被證明是質(zhì)量超凡的。Purecol膠原蛋白是由約97%的I型膠原蛋白,其余的為III型膠原蛋白組成的,它具有很高的單體含量可以用于測試凝膠滲透色譜。本產(chǎn)品的濃度約為3mg/ml,每個(gè)批次的具體濃度會(huì)寫于產(chǎn)品的COA上隨貨發(fā)出。PureCol是溶于0.01N鹽酸的端膠原蛋白,因此它的PH值約為2。PureCol膠原蛋白是理想的蛋白質(zhì)涂層,可用于準(zhǔn)備培養(yǎng)的細(xì)胞或者固體凝膠。PureCol膠原蛋白的包裝便于儲(chǔ)存和使用,經(jīng)過滅菌的溶液隨時(shí)可以使用。
產(chǎn)品信息 | PureCol® 膠原蛋白溶液 |
滅菌方法 | 過濾 |
形態(tài) | 溶液 |
包裝尺寸 | 100 ml |
儲(chǔ)存溫度 | 2-10 °C |
有效期 | 詳見產(chǎn)品包裝與隨貨發(fā)出的COA |
濃度(縮二脲蛋白測定) | 2.9-3.2 mg/ml |
純度(膠原蛋白濃度) | > 99.9% |
pH | pH約為2, 0.01 N HCl |
凝膠時(shí)間(凝膠時(shí)間測定法) | < 40 分鐘 |
原纖維形成(纖維形成) | >0.5 吸光度單位 |
聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS–PAGE) | > 85%含膠原蛋白在α,β,和γ帶,< 15%含比α帶快的膠原蛋白 |
無菌的 | 沒有細(xì)菌生長 |
內(nèi)毒素 (LAL) | < 1.0 EU/ml |
滲透壓 | ~ 20 mOsm |
電導(dǎo)率 | ~ 2300 µs/cm |
細(xì)胞附著實(shí)驗(yàn) | 通過 |
來源 | 牛皮–胃蛋白酶提取 |
使用方法:
涂層程序
注意:使用這些建議作為指南,以確定培養(yǎng)體系的宜涂層條件。
從瓶子中取出所需量的膠原蛋白,然后分配到稀釋容器中。
將pureCol®在水中稀釋至約50至100μg/ml(~1:30)。也可使用0.01 M HCl溶液。
輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物,直到材料*混合。
向培養(yǎng)表面添加適量的稀釋purecol®材料,確保整個(gè)表面都被涂上。
在室溫或37°C下孵育1-2小時(shí),蓋上蓋子。
孵育后,吸入任何剩余的物質(zhì)。
用無菌介質(zhì)或PBS仔細(xì)沖洗涂層表面,避免劃傷表面。
涂層表面可以使用。如果保持無菌,也可以在2-8°C潮濕或風(fēng)干條件下儲(chǔ)存。
三維凝膠制備工藝
緩慢加入1份冷凍10倍PBS或10倍培養(yǎng)基至8份冷凍膠原蛋白溶液中,輕輕旋轉(zhuǎn)。
使用0.1 M無菌NaOH將混合物的pH值調(diào)整為7.2–7.6。仔細(xì)監(jiān)控pH調(diào)節(jié)(pH計(jì)、酚紅或pH紙)。
用無菌水將終體積調(diào)整到總共10份。
為防止凝膠化,將混合物溫度保持在2–10°C。
為了形成凝膠,加熱至37°C允許凝膠形成約90至120分鐘。
細(xì)胞附著生物測定
為了證明細(xì)胞附著,將細(xì)胞接種到涂有基質(zhì)產(chǎn)品的表面和不涂基質(zhì)產(chǎn)品的陰性對(duì)照表面上。細(xì)胞用無血清DMEM培養(yǎng)基接種到表面。所有表面都被含有1%BSA的溶液堵塞。然后讓細(xì)胞在37°C下附著一(1)小時(shí)。用DPB清洗培養(yǎng)表面。結(jié)果表明,使用基質(zhì)產(chǎn)品進(jìn)行表面涂層的細(xì)胞明顯附著。
許多科研人員正從Matrigel產(chǎn)品使用習(xí)慣轉(zhuǎn)換過來,下面簡單比較下Advanced BioMatrix公司的PureCol和Matrigel:
Matrigel | PureCol |
濃度不均一 | 均一且濃度 |
鼠,腫瘤來源 | 牛,非腫瘤來源 |
未知組分 | 已知且明確的組分 |
需在冰上分裝操作 | 簡單易用 |
客戶可從上表對(duì)比Matrigel和VitroCol (人I型膠原蛋白),以人源簡單代替牛源。
PureCol® EZ Gel--3D膠原凝膠讓實(shí)驗(yàn)更簡單
含牛源I型膠原蛋白(5 mg/ml)的DMEM/F-12 培養(yǎng)基, 并添加谷氨酰胺,中性pH。
PureCol® EZ Gel是一款即用型I型膠原蛋白溶液,可在37°C培養(yǎng)箱中快速形成3D膠。成分包含純化的濃度為0.5%的I型膠原蛋白(~5 mg/ml) , DMEM/F-12 培養(yǎng)基以及L-glutamine 和 dipeptide (L-alanine-L-glutamine)混合物,可為細(xì)胞培養(yǎng)提供長期可持續(xù)的L-glutamine來源。
PureCol® EZ Gel通過培養(yǎng)基的預(yù)制和優(yōu)化調(diào)節(jié)達(dá)到中性pH,這款產(chǎn)品可避免制膠過程中因添加試劑、調(diào)整pH和操作等帶來的非一致性。
僅需在 37°C培養(yǎng)箱中即可形成3D膠,PureCol® EZ Gel就是這么簡單!
PureCol®
I型膠原蛋白溶液, 3 mg/ml, 100 mL
PureCol® 膠原為所有膠原蛋白純度的標(biāo)準(zhǔn)(膠原含量>99.9%),具有生物活性,且接近天然來源的膠原。 常用于以下應(yīng)用:
CytoSoft®--讓細(xì)胞像在體內(nèi)那樣溫和天然的生長
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