Visual-PCR 支原體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
更新時(shí)間：2019-12-18 點(diǎn)擊次數(shù)：1008
gmbiosciences Visual-PCR 支原體檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
Visual-PCR 支原體檢測(cè)試劑盒 |
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| 支原體一直被認(rèn)為是細(xì)胞培養(yǎng)的常見(jiàn)污染。在支原體檢測(cè)方法中，PCR是高度靈敏，特異和便捷的方法1。但是，到目前為止，所有可用的PCR試劑盒都是一個(gè)漫長(zhǎng)而費(fèi)力的過(guò)程。 |
| Visual-PCR TM 支原體檢測(cè)試劑盒是一種直觀，直觀，簡(jiǎn)便的檢測(cè)支原體的方法。它基于我們專有的Visual-PCR技術(shù)。該技術(shù)使PCR擴(kuò)增可以改變顏色。*，肉眼在可見(jiàn)光下可以對(duì)PCR進(jìn)行監(jiān)控。不需要DNA提取，將粗樣品直接用作PCR模板。PCR后凝膠電泳是不必要的。得益于Visual-PCR技術(shù)，用于細(xì)胞培養(yǎng)的常規(guī)支原體篩查變得像移液樣品一樣簡(jiǎn)單。 |
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支原體事實(shí)：
15％-80％的細(xì)胞培養(yǎng)物被
污染...
| | 如何減少
污染 | |
肌瘤檢測(cè)的 挑戰(zhàn) | |
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| 描述： | | | Visual-PCR TM 技術(shù)是PCR 的重大突破。PCR反應(yīng)本身產(chǎn)生明顯的顏色變化，肉眼很容易察覺(jué)。PCR結(jié)果*無(wú)需任何機(jī)器或設(shè)備即可直觀地讀出。PCR之前的DNA提取/樣品制備和PCR后的凝膠電泳不再需要。選擇覆蓋所有6種常見(jiàn)支原體物種的優(yōu)化引物組。將PCR敏感的變色成分添加到PCR混合物中。PCR后，陽(yáng)性反應(yīng)顯示為藍(lán)色，表明存在支原體DNA。PCR陰性顯示紫色。肉眼很容易識(shí)別出急劇的顏色變化（圖1,2,3,4）。無(wú)需DNA提取和預(yù)處理（離心，煮沸），就可以將各種粗略樣品（細(xì)胞培養(yǎng)物，冷凍細(xì)胞系，培養(yǎng)基，血清，咽喉拭子等）直接用作PCR模板。視覺(jué)PCRTM 試劑盒代表了簡(jiǎn)單的基于PCR的支原體檢測(cè)方法。 | | 好處： | - 革命性的技術(shù)：肉眼可視地監(jiān)控PCR
- 顏色急劇變化，并且可以通過(guò)肉眼輕松讀?。▓D1,2,3,4）
- 動(dòng)手時(shí)間少于5分鐘
- 2小時(shí)內(nèi)得到樣品
- 粗樣品直接用作PCR模板（圖3,4）
- 無(wú)需DNA提取，無(wú)需樣品預(yù)處理（例如旋轉(zhuǎn)，煮沸）
- 沒(méi)有PCR后凝膠電泳
- 無(wú)PCR后移液
- 適用于各種粗樣品：貼壁或非貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，冷凍細(xì)胞系，DMEM，RPMI-1640，血清，冷凍溶液，青霉素/鏈霉素溶液，非必需氨基酸，1x PBS，咽喉拭子等。 （圖3、4）
- 展示的靈敏度：10次拷貝/反應(yīng)（圖2）
- 檢測(cè)多種支原體種類/菌株（請(qǐng)單擊此處以獲取列表）
| | 協(xié)議： | | | 1.將組分A，B和C混合到完整的PCR雞尾酒中，每個(gè)反應(yīng)等分24ul。
2.添加1ul粗樣品并進(jìn)行PCR。目視檢查PCR試管的顏色。
 圖。1。Visual-PCR支原體檢測(cè)試劑盒的典型顏色變化。
有或沒(méi)有模板的PCR反應(yīng)均顯示不同的顏色。正是藍(lán)色，負(fù)是紫色。 |
|  | | 圖2。Visual-PCR支原體檢測(cè)試劑盒敏感。
將合成的奧拉支原體16s RNA基因的不同拷貝摻入PCR混合物中，然后進(jìn)行PCR。 |
| |  圖3。粗樣品直接用作PCR模板。
將培養(yǎng)試劑（DMEM，F(xiàn)BS，RPMI-1640）摻入支原體（1000拷貝/ ul），然后直接用作PCR模板。然后進(jìn)行PCR。 |
|  圖4。對(duì)來(lái)自可疑實(shí)驗(yàn)室的各種粗樣品進(jìn)行支原體測(cè)試。
通過(guò)Visual-PCR支原體檢測(cè)試劑盒對(duì)來(lái)自可疑實(shí)驗(yàn)室的各種樣品進(jìn)行了支原體污染檢測(cè)。粗樣品無(wú)需DNA提取或樣品預(yù)處理即可直接用作PCR模板。 |
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| | 套件內(nèi)容： | | | 成分A，B和C：準(zhǔn)備完整的PCR雞尾酒
成分D：陽(yáng)性對(duì)照DNA模板（Orale支原體的合成16s RNA基因） | | 儲(chǔ)存方式： | | | 產(chǎn)品在冰上運(yùn)輸，到達(dá)時(shí)存放在-20°C。
完整的PCR雞尾酒配制后應(yīng)保存在4°C下。穩(wěn)定1個(gè)月。
| | 何時(shí)檢測(cè)支原體： | 示例應(yīng)用程序： | | | •無(wú)法復(fù)制已發(fā)布的數(shù)據(jù)
• 數(shù)據(jù)不一致，偏倚和歪斜
•實(shí)驗(yàn)室中有人咳嗽或打噴嚏
•培養(yǎng)新的細(xì)胞系
•從外部來(lái)源獲得新的細(xì)胞系
•3個(gè)月未測(cè)試支原體
•共用了通風(fēng)櫥或CO2恒溫箱其他
•細(xì)胞培養(yǎng)生產(chǎn)
•細(xì)胞相關(guān)材料/產(chǎn)品的生產(chǎn) | | •研究細(xì)胞培養(yǎng)物，冷凍細(xì)胞系
•細(xì)胞培養(yǎng)基和補(bǔ)充品
•血清
•生物反應(yīng)器中的高滴度CHO培養(yǎng)物
• 生物反應(yīng)器中的高滴度NS0培養(yǎng)物
•細(xì)胞培養(yǎng)疫苗生產(chǎn)收獲物
•細(xì)胞培養(yǎng)抗體生產(chǎn)收獲物
•生物測(cè)定細(xì)胞系
•干細(xì)胞培養(yǎng)物
•淋巴細(xì)胞增殖培養(yǎng)
•細(xì)胞和組織治療培養(yǎng)
•咽拭子
•表面濕巾 | | 技術(shù)參考： | | | 1. Young L，Sung J，Stacey G，Masters JR。細(xì)胞培養(yǎng)中支原體的檢測(cè)。Nat Protoc。2010; 5（5）：929-34。 |
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