工程DNA聚合酶-來(lái)自博登湖
mypols是一家生物技術(shù)公司,起源于康斯坦茨大學(xué)(University of Konstanz),Andreas Marx教授的研究小組。
自2014年成立以來(lái),我們就提供DNA聚合酶方面的專業(yè)知識(shí):我們?yōu)槟腷iotec應(yīng)用設(shè)計(jì),定制,生產(chǎn)和凍干酶。我們專注于開(kāi)發(fā)新一代的DNA聚合酶,用于先進(jìn)且可靠的應(yīng)用,例如個(gè)性化醫(yī)學(xué),病原體檢測(cè),DNA和RNA診斷,法醫(yī)等等。
mypols Volcano2G說(shuō)明書
€95,00
Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級(jí)版本,具有進(jìn)一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。該酶是一種經(jīng)過(guò)工程改造的,極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和組合的DNA聚合酶,可通過(guò)定向的人工進(jìn)化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板(無(wú)需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟)直接促進(jìn)“零步驟” RT-PCR,因?yàn)槟孓D(zhuǎn)錄與循環(huán)PCR延伸步驟中的DNA擴(kuò)增同時(shí)進(jìn)行。這也允許在高溫下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),從而將在高溫下融化的RNA中強(qiáng)大的二級(jí)結(jié)構(gòu)所遇到的問(wèn)題降至低。
Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動(dòng)劑配制的,具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的工程穩(wěn)定的熱穩(wěn)定DNA聚合酶和穩(wěn)健的Taq DNA聚合酶的酶混合物。基于適體的熱啟動(dòng)劑設(shè)計(jì)用于在低溫下(例如,在移取反應(yīng)混合物時(shí))阻斷非特異性DNA聚合酶活性,但會(huì)在高于50-55°C的溫度下分解,從而釋放出現(xiàn)已*活化的DNA聚合酶。
Volcano2G DNA聚酶作為5 U / µl甘油庫(kù)存與適當(dāng)?shù)?x Volcano反應(yīng)緩沖液一起運(yùn)輸,該緩沖液針對(duì)60-300 bp的擴(kuò)增子進(jìn)行了優(yōu)化。
Volcano2G逆轉(zhuǎn)錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測(cè)RNA靶標(biāo)。它不需要Mn 2+即可 獲得宜活性。但是,可以通過(guò)向反應(yīng)中添加Mn 2+來(lái)進(jìn)一步優(yōu)化某些檢測(cè)方法(建議范圍是0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。
該產(chǎn)品以涼爽包裝出售。建議在到達(dá)-20°C時(shí)存放產(chǎn)品。
RT-PCR活性:已對(duì) Volcano3G RT-PCR Mix進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測(cè)試。在實(shí)時(shí)PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴(kuò)增出151 bp片段(HPRT1 mRNA),并可視化為單個(gè)擴(kuò)增產(chǎn)物。
DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質(zhì)特異性染色確定。
跳過(guò)逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。
Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶,非常穩(wěn)定,在95°C下的半衰期> 40分鐘。
當(dāng)添加實(shí)時(shí)PCR染料時(shí),Volcano2G DNA聚合酶也可用于實(shí)時(shí)PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域,使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過(guò)使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用總RNA的10倍稀釋系列檢測(cè)了NONO mRNA。
對(duì)于細(xì)胞RNA的可靠RT-PCR,樣品制備步驟*。然而,這些步驟費(fèi)力,費(fèi)時(shí)并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液,您可以用快速便捷的“零步長(zhǎng)”方案代替費(fèi)力的RNA制備。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液具有簡(jiǎn)化的“零步驟”工作流程,使您可以規(guī)避費(fèi)力的純化和提取步驟,從而節(jié)省了時(shí)間和金錢。
VolcanoCell2G RT-PCR 2x實(shí)現(xiàn)了低至單個(gè)細(xì)胞的檢測(cè)靈敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個(gè)隆德人中腦(LUHMES)細(xì)胞中檢測(cè)到GAPDH mRNA。
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