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工程DNA聚合酶-mypols

更新時間:2020-02-06      點(diǎn)擊次數(shù):5094

 

工程DNA聚合酶-mypols

mypols是一家生物技術(shù)公司,起源于康斯坦茨大學(xué)(University of Konstanz),Andreas Marx教授的研究小組。
自2014年成立以來,我們就提供DNA聚合酶方面的專業(yè)知識:我們?yōu)槟腷iotec應(yīng)用設(shè)計,定制,生產(chǎn)和凍干酶。我們專注于開發(fā)新一代的DNA聚合酶,用于先進(jìn)且可靠的應(yīng)用,例如個性化醫(yī)學(xué),病原體檢測,DNA和RNA診斷,法醫(yī)等等。

mypols Isotherm2G說明書

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

€349,00

Isotherm2G是一種嗜溫性DNA聚合酶,非常適合等溫擴(kuò)增。它可以從具有高鏈置換活性的DNA和RNA模板合成DNA。Isotherm2G已被突變,以提高反轉(zhuǎn)錄活性。在55-70°C之間活躍。Isotherm2G DNA聚合酶是等溫擴(kuò)增反應(yīng)的優(yōu)先選擇,如環(huán)介導(dǎo)的等溫擴(kuò)增(LAMP),鏈置換擴(kuò)增(SDA),滾環(huán)擴(kuò)增(RCA),分枝擴(kuò)增(RAM),基因組擴(kuò)增等。

 

Isotherm2G DNA聚合酶以8 U / µl含甘油溶液的形式提供。它與足夠量的10x反應(yīng)緩沖液一起使用,該緩沖液已針對等溫擴(kuò)增進(jìn)行了優(yōu)化。緩沖液中含3.25 mM鎂離子,終濃度為1x。鎂,引物和dNTPs的宜濃度在很大程度上取決于所應(yīng)用的應(yīng)用,應(yīng)該對其進(jìn)行優(yōu)化。

該產(chǎn)品以冰袋包裝出售。建議在到達(dá)-20°C時存放產(chǎn)品。

 

 

mypols Volcano2G說明書

 

Volcano2G DNA聚合酶

€95,00

火山2G DNA聚合酶

Volcano 2G是原始Volcano DNA聚合酶的高級版本,具有進(jìn)一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。該酶是一種經(jīng)過工程改造的,極耐熱的逆轉(zhuǎn)錄酶和組合的DNA聚合酶,可通過定向的人工進(jìn)化獲得。Volcano2G DNA聚合酶可直接從RNA模板(無需等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟)直接促進(jìn)“零步驟” RT-PCR,因為逆轉(zhuǎn)錄與循環(huán)PCR延伸步驟中的DNA擴(kuò)增同時進(jìn)行。這也允許在高溫下進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),從而將在高溫下融化的RNA中強(qiáng)大的二級結(jié)構(gòu)所遇到的問題降至低。

 

Volcano2G DNA聚合酶包含熱啟動劑配制的,具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性的工程穩(wěn)定的熱穩(wěn)定DNA聚合酶和穩(wěn)健的Taq DNA聚合酶的酶混合物?;谶m體的熱啟動劑設(shè)計用于在低溫下(例如,在移取反應(yīng)混合物時)阻斷非特異性DNA聚合酶活性,但會在高于50-55°C的溫度下分解,從而釋放出現(xiàn)已*活化的DNA聚合酶。

Volcano2G DNA聚酶作為5 U / µl甘油庫存與適當(dāng)?shù)?x Volcano反應(yīng)緩沖液一起運(yùn)輸,該緩沖液針對60-300 bp的擴(kuò)增子進(jìn)行了優(yōu)化。

Volcano2G逆轉(zhuǎn)錄酶可以可靠地從≥1 ng的總RNA輸入中檢測RNA靶標(biāo)。它不需要Mn 2+即可  獲得宜活性。但是,可以通過向反應(yīng)中添加Mn 2+來進(jìn)一步優(yōu)化某些檢測方法(建議范圍是0.5-1 mM,未提供Mn 2+)。

 

該產(chǎn)品以涼爽包裝出售。建議在到達(dá)-20°C時存放產(chǎn)品。

 

RT-PCR活性:已對 Volcano3G RT-PCR Mix進(jìn)行了成功的RT-PCR性能測試。在實時PCR循環(huán)儀中從人總RNA提取物中擴(kuò)增出151 bp片段(HPRT1 mRNA),并可視化為單個擴(kuò)增產(chǎn)物。

DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)控Volcano3G DNA聚合酶活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
酶濃度由蛋白質(zhì)特異性染色確定。

 

 

帶有“ 0步”方案的便捷RT-PCR

零步協(xié)議節(jié)省時間

跳過逆轉(zhuǎn)錄步驟。不需要等溫逆轉(zhuǎn)錄步驟。 

Volcano2G是一種具有PCR活性的逆轉(zhuǎn)錄酶,非常穩(wěn)定,在95°C下的半衰期> 40分鐘。

靈敏的RNA檢測

當(dāng)添加實時PCR染料時,Volcano2G DNA聚合酶也可用于實時PCR。Volcano2G具有Taq DNA聚合酶樣核酸酶結(jié)構(gòu)域,使其也適用于基于水解探針的分析。如此處所示,通過使用基于探針的qPCR分析和零步RT-PCR方案,使用總RNA的10倍稀釋系列檢測了NONO mRNA。

來自細(xì)胞的直接RT-PCR

對于細(xì)胞RNA的可靠RT-PCR,樣品制備步驟*。然而,這些步驟費(fèi)力,費(fèi)時并且需要額外的消耗品。使用我們的VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液,您可以用快速便捷的“零步長”方案代替費(fèi)力的RNA制備。

節(jié)省時間和金錢

VolcanoCell2G RT-PCR 2x預(yù)混液具有簡化的“零步驟”工作流程,使您可以規(guī)避費(fèi)力的純化和提取步驟,從而節(jié)省了時間和金錢。

出色的靈敏度

VolcanoCell2G RT-PCR 2x實現(xiàn)了低至單個細(xì)胞的檢測靈敏度。在此示例中,按照VolcanoCell2G協(xié)議從單個隆德人中腦(LUHMES)細(xì)胞中檢測到GAPDH mRNA。

 

Isotherm2G DNA polymerase

Isotherm2G DNA聚合酶

(目前缺貨直至另行通知,請?zhí)岢鲆螅?/span>

 

是一種嗜溫DNA聚合酶,它從DNA和RNA模板合成DNA,具有高鏈置換活性。Isotherm2G是原始Isotherm DNA聚合酶的下一代,具有進(jìn)一步改善的逆轉(zhuǎn)錄活性。宜溫度(55-70°C)使Isotherm2G DNA聚合酶成為等溫擴(kuò)增反應(yīng)的優(yōu)先選擇,如環(huán)介導(dǎo)等溫擴(kuò)增(LAMP),鏈置換擴(kuò)增(SDA),滾環(huán)擴(kuò)增(RCA),衍生物擴(kuò)增(RAM),基因組擴(kuò)增等。

#8801S

Isotherm2G DNA聚合酶

1600 U,8U /μl,200μl

#8801M

Isotherm2G DNA聚合酶

8000 U,8U /μl,1000μl

 

等溫擴(kuò)增  

 

就是這么簡單:只需在59°C溫育30分鐘,就可以使用LAMP方法擴(kuò)增DNA目標(biāo)(紅色曲線)和RNA目標(biāo)(藍(lán)色曲線)。Isotherm可用于RCA,SDA,RAM,LAMP和許多其他放大技術(shù)。

 

 

 

 

 

Isotherm DNA聚合酶也具有非常好的逆轉(zhuǎn)錄活性。擴(kuò)增后,可以進(jìn)行熔解曲線測量以確認(rèn)特定產(chǎn)物的產(chǎn)生。因此可以進(jìn)行DNA和RNA檢測,從而實現(xiàn)簡單的反應(yīng)設(shè)置,快速的反應(yīng)時間和閉管系統(tǒng)。

 

 

 

應(yīng)用

  • 快速,等溫檢測和鑒定DNA和RNA靶標(biāo)
  • 逆轉(zhuǎn)錄
  • 實時等溫檢測
  • LAMP,SDA,RCA,RAMP
  • 入門擴(kuò)展

反應(yīng)設(shè)置

零件

終濃度

底漆混合物(各種濃度)

各種μl

各個

dNTPs(10 mM)

1μl

400μM

10 x Isotherm2G反應(yīng)緩沖液

2.5μl

1X

等溫線DNA聚合酶8 U /μl

1μl

8 U /反應(yīng)

模板/樣品提取物

各種μl

 各個

不含核酸酶的水

總反應(yīng)體積高達(dá)25μl

 

將所有組件保存在冰上。
在使用前仔細(xì)旋轉(zhuǎn)并混合所有溶液。 

引物混合物和濃度很大程度上取決于所采用的等溫反應(yīng)方法。

Isotherm2G和Isotherm2G反應(yīng)緩沖液不含熒光染料。對于實時測量,請?zhí)砑舆m量的合適染料。

詳細(xì)的產(chǎn)品說明

 

內(nèi)容

Isotherm DNA聚合酶以含有甘油的8U /μl溶液形式提供。它配有針對等溫擴(kuò)增優(yōu)化的10倍反應(yīng)緩沖液。

 

質(zhì)量控制

DNA聚合酶活性:使用人工DNA模板和DNA引物監(jiān)測等溫線活性并將其調(diào)整為特定的DNA聚合酶活性。
通過蛋白質(zhì)特異性染色確定酶濃度。有關(guān)批次特定濃度,請通過info@mypols.de查詢更多信息。

 

法律信息

某些等溫擴(kuò)增方法可能受到保護(hù)。購買此產(chǎn)品不會向購買者傳達(dá)使用所購產(chǎn)品進(jìn)行任何商業(yè)目的的任何等溫擴(kuò)增方法的合法權(quán)利。

 

存儲

本產(chǎn)品采用冷藏包裝。請在抵達(dá)-20°C時存放產(chǎn)品。

 

貨號

品名

規(guī)格

品牌

8100S

Volcano2G DNA聚合酶

 250 U,5U /μl,50μl

mypols

8100M

Volcano2G DNA聚合酶

1000U,5U /μl,200μl

mypols

6101S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6101M

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix

500 reactions á 25 µl

mypols

5 x 1.25 ml

mypols

6201S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6301S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

6401S

Volcano3G RT-PCR Probe 2x Master Mix (+GreenDye, +ROX)

100 reactions á 25 µl

mypols

1 x 1.25 ml

mypols

7101S

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

100 reactions à 25 µl, 1 x 1.25 ml

mypols

7101M 

VolcanoCell2G RT-PCR 2x Master Mix (including separate lysis buffer)

500 reactions à 25 µl, 5 x 1.25 ml

mypols

8801S

Isotherm2G DNA polymerase

1600 U, 8U/µl, 200 µl

mypols

8801M

Isotherm2G DNA polymerase

8000 U, 8U/µl, 1000 µl

mypols

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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