Haematologic Technologies Inc. (HTI) 公司是一家專門致力于高質(zhì)量的人血漿蛋白的分離和特性研究的重要生產(chǎn)商, 其產(chǎn)品非常適用于體內(nèi)研究。在公司發(fā)展的第二個(gè)十年里,HTI將目光投向參與血液凝集和纖維蛋白溶解,以及骨代謝調(diào)節(jié)的蛋白的研究。HTI產(chǎn)品系列含有超 過(guò)100種高純度和特異性的蛋白,包括:酶原、酶、協(xié)同因子和抑制劑,同時(shí)還提供補(bǔ)體系列的單克隆和多克隆抗體。另外,HTI還提供一些技術(shù)服務(wù),如:蛋 白定制、純化、修飾、科研合作等。
蛋白C
的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)代表蛋白C的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu),其中:GLA =包含γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =包含與人表皮生長(zhǎng)因子同源的序列的區(qū)域,AP =在酶原轉(zhuǎn)化為糖原后釋放的活化肽?;钚越z氨酸蛋白酶,CATALYTIC DOMAIN =包含絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體的區(qū)域。箭頭指示在酶原激活期間被凝血酶蛋白水解切割的位點(diǎn)。
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過(guò)SDS-PAGE,> 95% |
活性測(cè)定 | 顯色分析<0.5%aPC活性 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過(guò)SDS-PAGE,> 95% |
活性測(cè)定 | 顯色分析<0.5%aPC活性 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
依賴維生素K的酶原(蛋白C)在肝臟中合成為單鏈多肽,隨后通過(guò)從前體分子(1)中去除二肽(Lys-146和Arg-147)轉(zhuǎn)化為二硫鍵連接的異二聚體。 ,2)。在血漿中已觀察到痕量的單鏈形式。輕鏈負(fù)責(zé)鈣蛋白C與磷脂囊泡的鈣依賴性結(jié)合,包含11個(gè)γ-羧基谷氨酸(gla)殘基,1個(gè)b-羥基天冬氨酸殘基和2個(gè)表皮生長(zhǎng)因子(EGF)同源域。絲氨酸蛋白酶催化三聯(lián)體位于重鏈中。人蛋白C易于從重鏈的COOH末端進(jìn)行蛋白水解切割多肽(Mr = 3000),產(chǎn)生稱為β蛋白C的改變形式。沒(méi)有觀察到α蛋白和β蛋白C之間的功能區(qū)別。人蛋白C重鏈的Arg-12(牛中的Arg-14)的單次切割將酶原轉(zhuǎn)化為絲氨酸蛋白酶,即活化的蛋白C。這種切割是由α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面之間的復(fù)合物催化的蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白。與其他依賴維生素K的凝血因子相反,活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物可催化這種裂解。與其他依賴維生素K的凝血因子相反,活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。α-凝血酶和內(nèi)皮細(xì)胞表面蛋白血栓調(diào)節(jié)蛋白之間的復(fù)合物可催化這種裂解。與其他依賴維生素K的凝血因子相反,活化的蛋白C通過(guò)催化因子Va和VIIIa的蛋白水解失活而充當(dāng)抗凝劑。APC還通過(guò)與纖溶酶原激活劑抑制劑形成復(fù)合物來(lái)促進(jìn)纖溶反應(yīng)。
牛蛋白C是通過(guò)修改Walker程序(3),從新鮮的檸檬酸牛血漿中制備的,如Haley等人所述。(4)。使用免疫親和層析(5)和常規(guī)技術(shù)(4,9)的組合,從新鮮的冷凍檸檬酸人血漿中制備人C蛋白。蛋白C以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20oC下。通過(guò)SDS-PAGE分析確定純度,并使用基于生色底物的測(cè)定法測(cè)量活性。
加載 | 人類蛋白C,每泳道1 µg |
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緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等離子體 | ||||||||
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血漿濃度 | 4-5 µg / ml(人)(6) 5-10 µg / ml(牛)(2) | ||||||||
行動(dòng)方式 | Zymogen; 絲氨酸蛋白酶激活蛋白C(APC)的前體 | ||||||||
分子量 | 62,000(人類)(7) 58,000(牛)(7) | ||||||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 4.4-4.8(人)(8) 4.2-4.5(牛)(8) | ||||||||
結(jié)構(gòu)體 | 兩條鏈,Mr = 41,000和21,000,二硫鍵連接,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域,兩個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域 | ||||||||
碳水化合物百分比 | 23%(人類)(7) 14%(牛)(7) | ||||||||
翻譯后修飾 | 11個(gè)gla殘基(牛),9個(gè)gla殘基(人),1個(gè)β-羥基天冬氨酸 |
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