Haematologic Technologies Inc. (HTI) 公司是一家專門致力于高質(zhì)量的人血漿蛋白的分離和特性研究的重要生產(chǎn)商, 其產(chǎn)品非常適用于體內(nèi)研究。在公司發(fā)展的第二個十年里,HTI將目光投向參與血液凝集和纖維蛋白溶解,以及骨代謝調(diào)節(jié)的蛋白的研究。HTI產(chǎn)品系列含有超 過100種高純度和特異性的蛋白,包括:酶原、酶、協(xié)同因子和抑制劑,同時還提供補體系列的單克隆和多克隆抗體。另外,HTI還提供一些技術(shù)服務(wù),如:蛋 白定制、純化、修飾、科研合作等。
Human Coagulation Factor XIII
凝血酶催化因子XII
的激活酶原,因子XIII是由2個相同的A亞基和2個相同的B亞基組成的四聚體(A2B2)。凝血酶從輕鏈的NH2末端切割Mr = 4000肽,從而暴露出活性位點巰基。B鏈二聚體的Ca2 +依賴性解離后,可以*表達活性。
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%(vol / vol)甘油/ 500uM EDTA |
存儲 | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 商業(yè)XIII ELISA |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個月 |
因子XIII是谷氨酰胺肽g-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶因子XIIIa(纖維蛋白連接酶,血漿轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶,纖維蛋白穩(wěn)定因子,EC 2.3.2.13)(1-3)的酶原形式。XIII因子在轉(zhuǎn)氨酶中是*的,因為它是體內(nèi)的酶原(2)。XIII因子在血漿的細(xì)胞外和血小板,巨核細(xì)胞,單核細(xì)胞,胎盤,子宮,肝臟和前列腺組織的細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)。血漿XIII因子在肝臟中合成,并以四聚體(Mr = 320,000)的形式循環(huán),由2對不同的亞基(A2B2)組成(4)。細(xì)胞內(nèi)形式在它們作為兩個相同的A鏈(A2)(7-11)的二聚體(Mr = 146,000)駐留的組織中合成。血漿XIII的A亞單位和細(xì)胞內(nèi)形式的XIII功能相同。
血漿(A2B2)中XIII因子的濃度約為30 mg / ml(8)。它是在凝血級聯(lián)反應(yīng)中被激活的后一種酶原,并且是該系統(tǒng)中僅有的不是絲氨酸蛋白酶的酶。血漿因子XIII(A2B2)向活性轉(zhuǎn)酰胺酶因子XIIIa(A2')的轉(zhuǎn)化是由于凝血酶(13)在A亞基的NH2-末端水解了Arg36-Gly37。僅在B亞基二聚體的Ca2 +(Kd = 10-3M)和纖維蛋白原(Kd = 10-8M)依賴性解離后,才能實現(xiàn)活性的*表達(14-16)。
在凝血級聯(lián)反應(yīng)中,因子XIIIa通過交聯(lián)血纖蛋白的a和g鏈來穩(wěn)定血纖蛋白凝塊。已知是XIIIa因子底物的其他可能具有止血作用的蛋白包括纖連蛋白(17),α2-抗纖溶酶(18),膠原蛋白(19),V因子(20),von Willebrand因子(19)和血小板反應(yīng)蛋白(21,22) )。
通過修改Folke(2)和Lorand(10)所述的程序(包括檸檬酸鋇,硫酸銨和甘氨酸沉淀,離子交換色譜和凝膠過濾),可以從新鮮的冷凍人血漿中純化因子XIII。通過SDS PAGE判斷,因子XIII是均質(zhì)的,比活約為50單位/ mg。XIII因子以含有0.5 mM EDTA的50%甘油提供,可在-20oC下儲存。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人因子XIII,每泳道1 µg |
緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 等離子體 | |||||
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血漿濃度 | 30微克/毫升(3) | |||||
行動方式 | Zymogen; 轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶的前體,因子XIIIa | |||||
分子量 | 320,000(4) | |||||
消光系數(shù) |
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等電點 | 5.2 | |||||
結(jié)構(gòu)體 | 2個非相同亞基的非共價結(jié)合對的四聚體(A2B2),A(Mr = 75,000),B(Mr = 88,000); A亞基具有6個游離巰基和潛在的活性位點 | |||||
碳水化合物含量 | A鏈:1%(22) B鏈:5%(22) |
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