Haematologic Technologies Inc. (HTI) 公司是一家專門致力于高質(zhì)量的人血漿蛋白的分離和特性研究的重要生產(chǎn)商, 其產(chǎn)品非常適用于體內(nèi)研究。在公司發(fā)展的第二個(gè)十年里,HTI將目光投向參與血液凝集和纖維蛋白溶解,以及骨代謝調(diào)節(jié)的蛋白的研究。HTI產(chǎn)品系列含有超 過100種高純度和特異性的蛋白,包括:酶原、酶、協(xié)同因子和抑制劑,同時(shí)還提供補(bǔ)體系列的單克隆和多克隆抗體。另外,HTI還提供一些技術(shù)服務(wù),如:蛋 白定制、純化、修飾、科研合作等。
Protein S
蛋白質(zhì)S
的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)S的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)如下:GLA =含有γ-羧基谷氨酸殘基的區(qū)域,EGF =含有與人表皮生長因子同源的序列的區(qū)域,TSR =凝血酶敏感區(qū)域,?=功能未知的區(qū)域,該區(qū)域取代了維生素K依賴性絲氨酸蛋白酶中發(fā)現(xiàn)的催化三聯(lián)體。
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
蛋白S是單鏈維生素K依賴性蛋白,被認(rèn)為在凝血和補(bǔ)體級(jí)聯(lián)反應(yīng)中均起作用(1,2)。血漿中循環(huán)的大約60%的蛋白S與C4b結(jié)合蛋白(C4BP)形成復(fù)合物。已經(jīng)表明,損傷后,蛋白S與帶負(fù)電荷的磷脂的g-羧基谷氨酸(gla)依賴性結(jié)合可能起到將C4BP集中在細(xì)胞表面的作用。
在凝血系統(tǒng)中,蛋白質(zhì)S起到抗凝血輔因子蛋白質(zhì)的作用。在Ca2 +和磷脂囊泡(Kd = 6x10-9M)存在的情況下,活化的蛋白C(APC)與蛋白S形成1:1的化學(xué)計(jì)量配合物(3)。在蛋白質(zhì)S的存在下,血漿和未刺激的血小板表面觀察到APC因子Va和VIIIa因子失活的速率有適度增加(3-10倍)。與C4BP結(jié)合的蛋白S不具有APC輔因子活性。近,已經(jīng)描述了增強(qiáng)蛋白S活性的另一種結(jié)合蛋白(4)。凝血酶引起的蛋白S的蛋白水解失活已被提議作為該系統(tǒng)中的調(diào)節(jié)機(jī)制。凝血酶的單次切割通過去除含有g(shù)la結(jié)構(gòu)域的NH2末端肽(Mr = 8000)消除了蛋白S輔因子的活性。
蛋白質(zhì)S的結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)與其他依賴維生素K的凝血因子相似,但蛋白質(zhì)S不具有催化三聯(lián)體。蛋白S是單鏈蛋白,在NH2末端結(jié)構(gòu)域中包含10個(gè)gla殘基,在4個(gè)表皮生長因子(EGF)結(jié)構(gòu)域中。
通過常規(guī)方法(9)和免疫親和色譜法的結(jié)合,從新鮮的冷凍血漿中分離出人蛋白S,如Jenny等人所述。(5)。純化的蛋白S以50%(體積/體積)甘油/水的形式提供,應(yīng)儲(chǔ)存在-20°C下。通過SDS-PAGE分析確定純度。
加載 | 人蛋白質(zhì)S,每泳道1 µg |
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緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化血漿,游離并與C4BP復(fù)合血漿濃度10 µg / ml(免費(fèi))(6)行動(dòng)方式活化蛋白C的輔助因子分子量69,000(7)消光系數(shù)
Ë |
| = 9.5(7) |
等電點(diǎn)5.0-5.5(7)結(jié)構(gòu)體單鏈,NH2-末端gla結(jié)構(gòu)域,四個(gè)EGF結(jié)構(gòu)域碳水化合物百分比7%(7)翻譯后修飾一個(gè)β-羥基天冬氨酸(8)十個(gè)gla殘基(7),三個(gè)β-羥基天冬酰胺(8)
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