上海起發(fā)現(xiàn)貨hti HCXI-0150說(shuō)明書(shū)
Human Coagulation Factor XI
因子X(jué)I
的域結(jié)構(gòu)表示因子X(jué)I單體的域結(jié)構(gòu)。鑒定為R1至R4的區(qū)域?qū)?yīng)于四個(gè)串聯(lián)的氨基酸序列重復(fù),其終包含因子X(jué)Ia的重鏈。在通過(guò)因子X(jué)IIa的蛋白水解活化過(guò)程中,包含因子X(jué)Ia的輕鏈的“ CATALYTIC DOMAIN”從重鏈區(qū)域切割。XIa因子的重鏈和輕鏈仍通過(guò)二硫鍵相連。成熟的因子X(jué)I分子是由兩個(gè)明顯相同的單體組成的同型二聚體,它們通過(guò)二硫鍵保持締合.
HCXI-0150 人為因素XI
尺寸 | 50微克 |
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公式 | 50%甘油/水(v / v) |
存儲(chǔ) | -20°攝氏度 |
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純度 | 通過(guò)SDS-PAGE,> 95% |
活性測(cè)定 | 凝血測(cè)定 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
因子X(jué)I是血漿糖蛋白,它與高分子量激肽原(1)在非共價(jià)復(fù)合物中循環(huán)。成熟的分子在肝臟中合成,是分子量約為160,000(2,3)的雙鏈同型二聚體。據(jù)估計(jì),總質(zhì)量的5%可歸因于碳水化合物(2)。兩個(gè)相同的單體的分子量為80,000,并通過(guò)二硫鍵連接在一起。因此,通過(guò)SDS-PAGE分析,因子X(jué)I表現(xiàn)為未還原的(Mr = 160,000)和還原的(Mr = 80,000)的單條帶。
因子X(jué)I作為酶原循環(huán),需要蛋白水解激活才能獲得絲氨酸蛋白酶活性。因子X(jué)IAa催化因子X(jué)I轉(zhuǎn)化為因子X(jué)Ia,并導(dǎo)致每個(gè)單體中的Arg369-Ile370鍵裂解(3)。因子X(jué)Ia由兩個(gè)NH2末端衍生的重鏈和兩個(gè)COOH末端衍生的輕鏈組成,所有這些鏈均通過(guò)二硫鍵結(jié)合在一起。因子X(jué)Ia通過(guò)催化因子IX到因子IXa的轉(zhuǎn)化而參與凝血的內(nèi)在途徑。缺乏血漿XI因子促凝活性會(huì)導(dǎo)致出血性疾病,稱為血漿凝血活酶前期缺乏(4,5)。在缺乏XI因子的患者中觀察到可變的出血傾向與XI因子活性或抗原水平均無(wú)關(guān)。
從歷*看,因子X(jué)I由于其在血漿中的濃度相對(duì)較低以及對(duì)蛋白水解的敏感性而很難純化(6)。因子X(jué)I是從新鮮的冷凍血漿中純化的,該血漿通過(guò)添加抑制劑來(lái)穩(wěn)定。首先用BaCl2處理血漿以去除維生素K依賴性蛋白,然后通過(guò)親和色譜法分離因子X(jué)I。在肝素瓊脂糖凝膠上進(jìn)行的后一個(gè)色譜步驟可制得完整的完整因子X(jué)I。成品以50%(體積/體積)的甘油/水供應(yīng),應(yīng)在-20oC下保存。
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 人血因子X(jué)I,每泳道1 µg |
緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見(jiàn)BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
特別說(shuō)明 | 由于存在高達(dá)50%的beta形式,重鏈?zhǔn)请p鏈體。α-Xa到β-Xa的轉(zhuǎn)化是通過(guò)α-Xa對(duì)α-Xa的自動(dòng)切割而發(fā)生的,從而導(dǎo)致了COOH末端肽的丟失。 |
本土化 | 等離子體; 與高分子量激肽原結(jié)合 | |||||
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血漿濃度 | 2-7 µg / ml(2,3,7,8) | |||||
行動(dòng)方式 | Zymogen; 絲氨酸蛋白酶因子X(jué)Ia的前體 | |||||
分子量 | 160,000(人類)(2,3) | |||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 8.9-9.1 | |||||
結(jié)構(gòu)體 | 同源二聚體,由兩個(gè)明顯相同的亞基(Mr?80,000)通過(guò)二硫鍵連接在一起。單體包含四個(gè)串聯(lián)氨基酸重復(fù)序列,與血漿前激肽釋放酶具有同源性(9)。 | |||||
碳水化合物百分比 | 5%(人類)(2) |
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