上海起發(fā)haemtech HCI-0150R現(xiàn)貨說明書
纖維蛋白原
的域結(jié)構(gòu)顯示了Aα,Bβ和γ鏈的三角結(jié)構(gòu),釋放FPA和FPB的IIa裂解位點(diǎn)(IIa)以及產(chǎn)生D片段和E片段的纖溶酶裂解位點(diǎn)(Pm)。
上海起發(fā)haemtech HCI-0150R現(xiàn)貨
尺寸 | 2毫克 |
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公式 | 10 mM NaCit,10 mM NaPO 4,pH 7.3 |
存儲 | -80°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
尺寸 | 200微克 |
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公式 | 由0.9%NaCl,3%甘氨酸(w / v)凍干 |
存儲 | 4°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
尺寸 | 100微克 |
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公式 | 由0.9%NaCl,3%甘氨酸(w / v)凍干 |
存儲 | 4°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
尺寸 | 1毫克 |
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公式 | 10 mM NaCit,10 mM NaPO 4,pH 7.3 |
存儲 | -70°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
活性測定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
凝血酶(IIa)催化的可溶性纖維蛋白原(Fbg)裂解形成纖維蛋白(Fbn)是凝血級聯(lián)反應(yīng)中的終蛋白水解事件。這些可溶性Fbn單體自發(fā)聚合形成不溶性Fbn網(wǎng)絡(luò),該網(wǎng)絡(luò)通過因子XIIIa催化的α和γ鏈的lys和glu殘基交聯(lián)而穩(wěn)定。Fbn網(wǎng)絡(luò)是止血栓的主要蛋白質(zhì)成分。
血漿纖維蛋白原是肝臟中合成的大糖蛋白(Mr = 340,000),濃度為2.6 mg / ml。它是由三對二硫鍵連接的不同多肽鏈(Aα,Bβ和γ)組成的二硫鍵連接的二聚體。Aα鏈的顯著特征是N端肽(纖維蛋白肽A(FPA,1-16)),XIIIa因子交聯(lián)位點(diǎn)和2個(gè)磷酸化位點(diǎn)。合成時(shí),F(xiàn)bg被*磷酸化,但僅以20-30%的磷酸化水平循環(huán)。Bβ鏈包含纖維蛋白肽B(FPB,1-14),3個(gè)N-連接的碳水化合物部分(Mr = 2500)之一和N-末端焦谷氨酸。γ鏈包含另一個(gè)N-連接的糖基化位點(diǎn)和XIIIa因子交聯(lián)位點(diǎn)。2個(gè)伸長的亞基((AαBβγ)2)以反平行的方式排列,形成6條鏈的三點(diǎn)狀排列。節(jié)點(diǎn)由3條平行鏈之間的二硫環(huán)形成。中心節(jié)點(diǎn)(n-二硫鍵結(jié),E結(jié)構(gòu)域)由通過11個(gè)二硫鍵連接在一起的所有6條鏈的N-末端形成。該區(qū)域包含2個(gè)IIa敏感位點(diǎn)。通過在R16-G17處裂解釋放的FPA產(chǎn)生Fbn I,從而暴露Aα鏈上的聚合位點(diǎn)(17-20)。這些區(qū)域與Fbn的D結(jié)構(gòu)域上的互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成原纖維。隨后,F(xiàn)PB(R14-G15)從Bβ鏈的IIa裂解暴露出額外的聚合位點(diǎn),并促進(jìn)Fbn網(wǎng)絡(luò)的橫向生長。通過在R16-G17處裂解釋放的FPA產(chǎn)生Fbn I,從而暴露Aα鏈上的聚合位點(diǎn)(17-20)。這些區(qū)域與Fbn的D結(jié)構(gòu)域上的互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成原纖維。隨后,F(xiàn)PB(R14-G15)從Bβ鏈的IIa裂解暴露出額外的聚合位點(diǎn),并促進(jìn)Fbn網(wǎng)絡(luò)的橫向生長。通過在R16-G17處裂解釋放的FPA產(chǎn)生Fbn I,從而暴露Aα鏈上的聚合位點(diǎn)(17-20)。這些區(qū)域與Fbn的D結(jié)構(gòu)域上的互補(bǔ)區(qū)域結(jié)合形成原纖維。隨后,F(xiàn)PB(R14-G15)從Bβ鏈的IIa裂解暴露出額外的聚合位點(diǎn),并促進(jìn)Fbn網(wǎng)絡(luò)的橫向生長。
中心節(jié)點(diǎn)(E域)和C端節(jié)點(diǎn)(D域)之間的2個(gè)域中的每個(gè)域均由彼此纏繞的Aα,Bβ和γ鏈的平行α螺旋區(qū)域組成,形成“線圈”極性殘基朝外,非極性殘基形成疏水核。在該區(qū)域中,所有3條鏈均具有蛋白酶(纖溶酶)敏感位點(diǎn)。另一個(gè)主要的纖溶酶主要敏感位點(diǎn)是來自C端節(jié)點(diǎn)的α鏈的親水性擾動。在這些位點(diǎn)上受控的纖溶酶降解將Fbg轉(zhuǎn)化為片段D和片段E。通過鹽分餾,凝膠過濾和離子交換色譜分離各個(gè)片段。將片段凍干以供儲存在4℃下。高度純化的研究級纖維蛋白原(> 95%可凝塊)是通過常規(guī)技術(shù)和親和力技術(shù)的組合制備的。它以檸檬酸磷酸鹽的冷凍溶液形式提供,可在-80°C下儲存。
上海起發(fā)haemtech HCI-0150R現(xiàn)貨
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris |
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加載 | 每泳道1 µg;純化的人纖維蛋白原 |
緩沖 | 拖把 |
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(191 kDa),磷酸化酶B(97 kDa),BSA(64 kDa),谷氨酸脫氫酶(51 kDa),酒精脫氫酶(39 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(19 kDa),溶菌酶(14 kDa) |
本土化 | 血漿,血小板 | |||||
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血漿濃度 | 2.6毫克/毫升 | |||||
行動方式 | 前體分子被凝血酶切割形成纖維蛋白凝塊。 | |||||
分子量 | 340,000 | |||||
消光系數(shù) |
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等電點(diǎn) | 5.1-6.3 | |||||
結(jié)構(gòu)體 | 3對不相同的鏈Aα(Mr = 66,800),Bβ(Mr = 52,000)和γ(Mr = 46,500)的二聚體,帶有2個(gè)末端D結(jié)構(gòu)域和一個(gè)中央E結(jié)構(gòu)域的細(xì)長三叉形分子。XIIIa因子交聯(lián)位點(diǎn)在Aα鏈的E328,E366,K508,K584處;在Bβ鏈中的E398和K406處。 | |||||
碳水化合物百分比 | 3% | |||||
翻譯后修飾 | Aα鏈:2個(gè)磷酸化絲氨酸,S3,S346Bβ 鏈:N364糖基化位點(diǎn)Mr = 2500,N末端焦谷氨酸 γ鏈:糖基化N52 |
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