OncoImmunin專有技術(shù)
OncoImmunin,Inc.設(shè)計,合成,驗(yàn)證并申請了專有的新型分子,可以用作熒光蛋白酶底物,用于測定活細(xì)胞以及血清中寡核苷酸(例如siRNA)的體內(nèi)遞送酶活性,無毒性以及在溶液中表現(xiàn)出優(yōu)異性能后復(fù)活或小分子藥物在體內(nèi)試驗(yàn)中均未通過 與其他熒光底物相比,OncoImmunin蛋白酶底物的優(yōu)勢是4倍:
OncoImmunin的熒光蛋白酶底物設(shè)計允許使用熒光顯微鏡確定細(xì)胞內(nèi)酶活性。緩沖液和人血清中活性的測定可以使用標(biāo)準(zhǔn)熒光計完成,或者對于大樣品通量,可以使用專有的高通量篩選(HTS)系統(tǒng)(請參閱頁面) 注-吸收率測量也是可能的。 要了解有關(guān)OncoImmunin,Inc.及其酶活性測定試劑盒的更多信息,請從下面的類別中進(jìn)行選擇:
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熒光蛋白酶底物的基本原理
菜單
熒光團(tuán)的選擇 進(jìn)行熒光團(tuán)的選擇,使得激發(fā)和發(fā)射都在可見波長范圍內(nèi)。選擇這種特定染料的理由是,生物材料包含在紫外線波長域中既吸收又發(fā)出熒光的分子。這種自發(fā)熒光會阻礙樣品中少量活性的測定,并降低活性測定的可靠性。 基板設(shè)計和計算機(jī)建模結(jié)構(gòu) 肽底物與共價偶聯(lián)的熒光團(tuán)合成。后者在策略上遠(yuǎn)離靶序列,以確保不干擾蛋白水解切割。 彈性蛋白酶底物的代表性計算機(jī)模型結(jié)構(gòu)如下所示,其中黃帶代表肽主鏈構(gòu)象,青色代表附著的熒光團(tuán)。綠色箭頭表示切割位點(diǎn)。 顯示了該肽的兩個不同視圖。 注意:首先,肽主鏈具有類似于 卵裂誘導(dǎo)的熒光和吸收變化 在完整的肽中,青色熒光團(tuán)形成基態(tài)二聚體。該基態(tài)二聚體的吸收光譜可以用激子理論來適合地描述。肽裂解消除了這種染料與染料的相互作用,并導(dǎo)致熒光增加和吸收變化顯著。 |
彈性蛋白酶測定
該彈性蛋白酶測定法可在多種條件下工作。在溶液或細(xì)胞懸液中進(jìn)行測定。即使在顯微鏡下! 例如,一種應(yīng)用是使用熒光酶標(biāo)儀篩選抗炎藥候選物。用豬胰彈性蛋白酶測定的該底物的Km在800 nM范圍內(nèi),而其他基于pNA和AMC生色團(tuán)的生色底物的Km值分別為6.2和0.8 mM [請參見MJ Castillo,K. Nakajima,M [Zimmerman and JC Powers Anal Biochem 99:53-64(1979)]。 當(dāng)您認(rèn)為現(xiàn)在可以在您認(rèn)為不可能的條件下測量彈性蛋白酶活性時,這確實(shí)是技術(shù)驅(qū)動型科學(xué)的一個例子。 沒有其他彈性蛋白酶檢測法是喜歡的! 敏感 - 與公里在NM-800,這是熒光,所有后 從下面的應(yīng)用筆記中選擇:溶液測量 您也可以將這些熒光底物用于:
帶有支持?jǐn)?shù)據(jù)的應(yīng)用筆記即將發(fā)布 |
凋亡測定和試劑
與OncoImmunin的CaspaLux ® 基材,胱天蛋白酶的-1,6,8和活動-9可以被測量。此外,通過以互補(bǔ)色組合5種不同的底物,可同時通過流式細(xì)胞術(shù)和顯微鏡在活細(xì)胞中確定多種caspase活性。高通量分析也是可用的。
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