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bellbrooklabs AptaFluor® HTS Assays

更新時(shí)間:2020-05-06      點(diǎn)擊次數(shù):965

bellbrooklabs AptaFluor® HTS Assays

BellBrook的AptaFluor®檢測(cè)平臺(tái)利用適體的功能來加速藥物發(fā)現(xiàn)。新的AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法使用新穎的拆分適體方法,并具有TR-FRET讀數(shù)來測(cè)量甲基轉(zhuǎn)移酶活性。未來的檢測(cè)將采用多種檢測(cè)策略,以提供強(qiáng)大,易于使用的均相檢測(cè)進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)。

AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定

AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法使用適體,可與甲基轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)的產(chǎn)物SAH選擇性結(jié)合。核糖開關(guān)的精美親和力和選擇性與陽性TR-FRET信號(hào)相結(jié)合,能夠以的靈敏度篩選和分析組蛋白甲基轉(zhuǎn)移酶。

 

通過TR-FRET讀數(shù)直接檢測(cè)SAH

AptaFluor海報(bào)演示

AptaFluor®SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定

AptaFluor –利用適體的力量進(jìn)行藥物發(fā)現(xiàn)

表觀遺傳調(diào)控已被證明是多種疾病的成因。甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)目前是一個(gè)活躍的領(lǐng)域。甲基轉(zhuǎn)移酶使用S-腺苷甲硫氨酸(SAM)作為甲基供體甲基化各種底物,剩下的常見產(chǎn)物S-腺苷同型半胱氨酸(SAH)。

AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法使用天然存在的適體或核糖開關(guān),可選擇性地與SAH(甲基轉(zhuǎn)移酶反應(yīng)的不變產(chǎn)物)結(jié)合。核糖開關(guān)的精美親和力和選擇性與陽性TR-FRET信號(hào)相結(jié)合,能夠以的靈敏度篩選和分析甲基轉(zhuǎn)移酶。

通過直接檢測(cè)均質(zhì)形式的SAH,實(shí)際上可以使用任何甲基轉(zhuǎn)移酶進(jìn)行篩選和酶學(xué)研究。該測(cè)定法可作為協(xié)助研究人員進(jìn)行命中鑒定和鑒定的工具,以尋求開發(fā)新的甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑作為疾病治療方法。

通過TR-FRET讀數(shù)直接檢測(cè)SAH

超敏感

敏感的HTS甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法的LLD為0.6 nM SAH。這大大減少了酶的使用,并允許在 SAM的K m或以下進(jìn)行分析。

 

通過TR-FRET讀數(shù)直接檢測(cè)SAH

超敏感

敏感的HTS甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法的LLD為0.6 nM SAH。這大大減少了酶的使用,并允許在 SAM的K m或以下進(jìn)行分析。

比較本海報(bào)中不同方法的測(cè)定靈敏度

使用生理SAM和AptaFluor甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定靈敏檢測(cè)PRMT4

 

與低于100nM的生理SAM濃度一起使用

穩(wěn)定

出色的試劑和信號(hào)穩(wěn)定性降低了測(cè)定的可變性,并實(shí)現(xiàn)了自動(dòng)化的工作流程。

強(qiáng)大的

在各種測(cè)定條件下均具有出色的Z'。

具有0.2 uM或2 uM SAM和組蛋白底物的PRMT4酶為陽性對(duì)照。PRMT4和組蛋白底物作為陰性對(duì)照。

簡(jiǎn)單的混合閱讀

AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶測(cè)定法采用簡(jiǎn)單的混合和讀取格式。運(yùn)行您的酶反應(yīng),添加淬滅試劑,添加AptaFluor試劑,并閱讀板。

兼容各種MTase受體底物

MT受體底物的耐受性。在存在核小體(10 ng /μL),組蛋白H3-3(3 ng /μL),組蛋白H3(1-21)肽(10μM)和Poly d(IC)的情況下建立100 nM SAH-SAM標(biāo)準(zhǔn)曲線)(2.5 mU /μL); 控制孔缺少M(fèi)T底物。

通用測(cè)定法–與幾乎所有甲基轉(zhuǎn)移酶一起使用

甲基轉(zhuǎn)移酶和底物圖

 

 

AptaFluor SAH甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒

 

 

 

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