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殘留DNA提取試劑盒

更新時間:2020-05-06      點擊次數(shù):2170

殘留DNA提取試劑盒(碘化納法) 

殘留DNA提取試劑盒遵照中國藥典記載的碘化納法,適用于疫苗和治療用生物制品所含宿主細胞殘余DNA的提 取。

殘留DNA提取試劑盒可以提取樣品中含有的極微量的DNA,回收率較高。

DNA的提取操作時間為60-90 min。

提取的DNA可以通過qPCR進行定量。

◆特點

● 遵照中國藥典登載的碘化納法

 ● 高回收率

● 單管操作(無需換管) ,耗時僅60-90 min

● 不需要苯酚和氯方等有機溶劑

● 兼容多種DNA *1 為使DNA檢測方法與標(biāo)準(zhǔn)保持同步,中國藥典(The Chinese Pharmacopoeia)宣布建立殘留細胞 *1 DNA檢測國家標(biāo)準(zhǔn)。碘化納法將作為殘留DNA提取方法,被新增至2020版的中國藥典中。

◆原理 1. 使樣品中的蛋白質(zhì)和脂質(zhì)溶于碘化納和N-月桂基肌氨酸鈉; 2. 異丙醇與糖原選擇性地共沉淀DNA。

 

◆使用方法

 

方法1 

應(yīng)用實例 DNA spiking test(加標(biāo)回收實驗) 

 

DNA Extractor™ Kit可以高產(chǎn)量提取殘留DNA,甚至少量殘留DNA。 

 

上海起發(fā)Ivy Fine Chemicals B48202現(xiàn)貨

貨號品名規(guī)格品牌
B48202100L Glycogen Solution;1 mL Detergent Combo Solution;25 mL Sodium Iodide Solution;30 mLWashing Buffer (No Ethanol)DNA提取器試劑盒 kit  Ivy Fine Chemicals

 

Ivy Fine Chemicals Corporation,

目錄號B48202,50 次浸提,

4 ℃ 下可穩(wěn)定儲存 2 年

僅供實驗室使用

 

溶液制備:

向清洗緩沖液中加入 70 mL 乙醇,

向碘化納溶液中加入 50 L 糖原

向清洗緩沖液中加入 2 L 糖原

 

DNA 提取程序:

向 2 mL 微量離心管中加入 500 L 各樣品或稀釋液

向各試管中加入 20 L 清潔劑組合溶液,并輕輕渦旋

  • 選項:如果高濃度的蛋白質(zhì)干擾 DNA 提取和隨后的 DNA 分析,每個樣品用 20 L 蛋白酶 K (10 mg/mL) 在 60 C 消化 20 min,然后在 95 C 滅活酶 5 min

向各微量離心管中加入 500 L 碘化納溶液,輕輕渦旋

在 50 ℃ 下孵育 10 min

加入 900 L 異丙醇并渦旋。

室溫下孵育 30 min

以 12000 rpm 離心 15 min

輕輕倒出或吸取上清液

加入 1.8 mL 洗滌緩沖液(含乙醇)并渦旋

以 12000 rpm 離心 10 min

輕輕倒出或吸取上清液

風(fēng)干 DNA

加入 20-60 L 水,輕輕渦旋溶解 DNA

純化的 DNA 可通過 PCR、real time PCR、限制性內(nèi)切酶切、DNA 測序、Picogreen 熒光染色進行分析

流程圖:

 

上海起發(fā)實驗試劑有限公司
地址:上海浦東川沙鎮(zhèn)川沙路6619號上海起發(fā)實驗試劑有限公司
郵箱:xs1@78bio.com
傳真:021-50724961
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