糖苷內(nèi)切酶是從糖蛋白上切割完整聚糖的酶。這些酶在不含甘油,NaCl或其他添加劑(如EDTA)的清潔制劑中高度穩(wěn)定。測試所有酶是否沒有蛋白水解或意外的糖苷活性。
糖苷內(nèi)切酶是糖蛋白分析中使用廣泛的酶。這些酶從糖蛋白中釋放出完整的聚糖,而糖苷外切酶則釋放出單個的單糖(即唾液酸,半乳糖,β-N-乙酰氨基葡糖胺,甘露糖等)。
盡管PNGase F實際上是酰胺酶,但由于其裂解完整的N-連接聚糖的相似活性,通常將其包括在酶組中。它在天冬酰胺氨基酸和N-連接聚糖的殼二糖核心的一個β-N-乙酰氨基葡萄糖胺糖(GlcNAc)之間裂解。Endo F酶和Endo H在一個和第二個GlcNAc之間裂解N-連接的聚糖,留下帶電荷的殘基,這有助于增加去糖基化蛋白質(zhì)的溶解度,從而降低蛋白質(zhì)聚集體沉淀的可能性。PNGase F裂解所有N-連接的聚糖,而Endo H和Endo F酶則去除特定類型的N-連接的聚糖。
O-糖苷酶也包括在這種酶的分類中,其從絲氨酸或蘇氨酸氨基酸中去除了核心1 O-連接的聚糖(Gal-β(1-3)GalNAc- α)。通常,O-連接的聚糖含有在分支和線性連接中均與半乳糖連接的另外的單糖,需要使用外切糖苷酶,例如唾液酸酶和半乳糖苷酶來除去另外的糖。
PNGase F適用于從糖蛋白和糖肽中釋放所有類型(高甘露糖,雜合和復雜)的N-連接聚糖。PNGase F不會去除植物糖蛋白上常見的含有α(1-3)連接的核心巖藻糖的寡糖。
下表列出并比較了Ludger提供的PNGase F酶試劑盒。
LZ-rPNGaseF-試劑盒
LudgerZyme重組PNGase F試劑盒(新英格蘭生物實驗室)。
從Elizabethkingia miricola在大腸桿菌
產(chǎn)品指南
試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達150個反應。
E-PNG01
從伊麗莎白女王腦膜炎病菌
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-PNG01-200 *以前為E-PNG05
從伊麗莎白女王腦膜炎病菌
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僅包含酶。
足以進行多達200個反應。
E-rPNG01
重組PNG酶f起Elizabethkingia miricola。
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-EF01
Endo F1從肽和蛋白質(zhì)中裂解出高甘露糖和一些雜合型N-聚糖。
從重組基因Elizabethkingia miricola在大腸桿菌
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-EF02
從肽和蛋白質(zhì)中選擇性釋放雙天線和高甘露糖(以40倍的降低速率)聚糖。
從重組基因Elizabethkingia miricola在大腸桿菌
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-EF03
從肽和蛋白質(zhì)中選擇性釋放triantennarry和α(1-6)巖藻糖基化雙觸角N-聚糖。
從重組基因Elizabethkingia miricola在大腸桿菌
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-EHO2
Endo H裂解天冬酰胺連接的或高甘露糖寡糖,但不裂解復雜寡糖。
從重組基因鏈霉菌plicatus的在大腸桿菌
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
E-G001
僅切割連接至糖蛋白或糖肽絲氨酸或蘇氨酸殘基的未取代的Gal-β(1-3)GalNAc- α二糖。
重組肺炎鏈球菌在大腸桿菌中。
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
KE-DG01
該試劑盒包括使糖蛋白去糖基化,去除所有N-連接的寡糖和許多O-連接的糖所需的酶和緩沖液。
這些酶分別包裝在20微升的小瓶中。與我們的酶混合物KE-DGMX相比,這使研究人員可以靈活地更充分地表征與其糖蛋白相連的聚糖。
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20微升的各在分開的小瓶下列酶的:PNG酶F(Elizabethkingia腦膜),O糖苷酶(肺炎鏈球菌),唾液酸酶(節(jié)桿菌),β半乳糖苷酶(肺炎鏈球菌),葡萄糖苷酶(肺炎鏈球菌)。
試劑盒包括酶,反應緩沖液和牛胎球蛋白(對照)。
每種酶多可進行20個反應。
KE-DGMX
此用于蛋白質(zhì)脫糖基化的試劑盒包括我們的DeGlycoMx,它是酶的預混混合物,可通過10次反應(多每次反應50微克蛋白質(zhì))從0.5 mg糖蛋白中去除所有N-連接的寡糖和大多數(shù)O-連接的糖。
該試劑盒易于使用且有效:將2 µL DeGlycoMx酶添加到變性樣品和隨附的緩沖液中,并在37°C孵育3小時。
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酶可以被設置為一個20μL預混雞尾酒包括:PNG酶F(Elizabethkingia腦膜),O糖苷酶(肺炎鏈球菌),唾液酸酶(節(jié)桿菌),β半乳糖苷酶(肺炎鏈球菌),葡萄糖苷酶(肺炎鏈球菌)。
試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達20個反應。
E-XBG01
內(nèi)-β-半乳糖苷酶在無支鏈,重復的聚-N-乙酰基乳糖胺結構中裂解內(nèi)部β(1-4)半乳糖鍵。
從重組基因脆弱擬桿菌在大腸桿菌。
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試劑盒包括酶加反應緩沖液。
足以進行多達60個反應。
LZ-CER-HM-KIT
神經(jīng)酰胺聚糖酶通過切割ß-糖基鍵來使多種糖鞘脂去糖基化。
從廣ir
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穩(wěn)定性證書
試劑盒包括酶,反應緩沖液和GM1標準品。
多可進行25次反應。
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