ATP合酶在光合作用過程中通過電子傳遞鏈釋放的能量,將質(zhì)子穿過膜至ATP合成。其中ATP合酶包括9種蛋白:AtpA, AtpB, AtpC, AtpD, AtpE, AtpI, AtpF, AtpG, AtpH。它由兩個復合物組成:CF1, CF0。其中,CF1包含α, β, γ, δ, ε五個亞基,分別由atpA,atpB, atpC, atpD, atpE基因編碼;CF0包含IV/a, I/b, II/b’, III/c 四個亞基,分別由atpI, atpF, atpG, atpH基因編碼。
在高等植物葉綠體中,atp基因定位于質(zhì)體基因組和核基因組,并且被分為兩個不同的clusters,分別是:the large atp operons 和 the small atp operons。
一、針對AtpA, AtpB, AtpC蛋白研究,我們研發(fā)了以下植物抗體:
注:Western Blot結(jié)果如上。PHY0010為AtpA抗體,免疫原為擬南芥AtpA (ATCG00120)靠近C端的多肽序列。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg,用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0311為AtpA抗體,免疫原為擬南芥AtpA (ATCG00120)全長的重組蛋白。上樣蛋白,上樣量以及PAGE膠與PHY0010相同。
注:Western Blot結(jié)果如上。PHY0011A為AtpB抗體,免疫原為擬南芥AtpB (ATCG00480)靠近N端的多肽序列。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.25μg, 0.5μg, 0.75μg,用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0312為AtpB抗體,免疫原為擬南芥AtpB (ATCG00480)全長的重組蛋白。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg;用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
注:Western Blot結(jié)果如上。PHY0161為AtpC抗體,免疫原為擬南芥AtpC1 (AT4G04640)靠近N端的14個氨基酸多肽,此序列與AtpC2 (AT1G15700)同源性為93%。上樣蛋白:1-3泳道為野生型擬南芥類囊體膜蛋白,4泳道為擬南芥突變體的類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,4泳道上樣量為0.5ug,用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0359為AtpC2抗體,免疫原為擬南芥AtpC2 (AT1G15700)靠近C端的多肽序列。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg;用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
二、針對AtpD, AtpE, AtpG, AtpF, AtpH, AtpI蛋白研究,我們研發(fā)了以下的植物抗體:
注:Western Blot結(jié)果如上。PHY0314為AtpD抗體,免疫原為擬南芥AtpD (AT4G09650)全長的重組蛋白。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0315為AtpE抗體,免疫原為免疫原為擬南芥AtpE (ATCG00470)全長的重組蛋白。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.5μg, 1.25μg, 2μg;用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0170S為AtpG抗體,免疫原為擬南芥AtpG (AT4G32260)靠近N端的多肽序列。上樣蛋白:1-3泳道為野生型擬南芥類囊體膜蛋白,4泳道為擬南芥突變體的類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1μg, 0.25μg, 0.5μg,4泳道上樣量為0.5ug;用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
注:Western Blot結(jié)果如上。PHY0316為AtpF抗體,免疫原為擬南芥AtpF (ATCG00130)全長的重組蛋白。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.1 μg, 0.25 μg, 0.5 μg,用15% SDS-Urea-PAGE電泳。
PHY0114A為AtpH抗體,免疫原為擬南芥AtpH (ATCG00140)的多肽序列。上樣蛋白:擬南芥類囊體膜蛋白;1-3泳道上樣量分別是0.25 μg, 0.5 μg, 1 μg,用Tricine-SDS-PAGE電泳。
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