finabio重組CRM197白喉毒素突變體-上海起發(fā)現(xiàn)貨
可提供cGMP等級(jí),可用于批準(zhǔn)上市的結(jié)合疫苗
產(chǎn)品描述:
來(lái)源:熒光假單胞菌重組表達(dá)的 CRM197
產(chǎn)品分子量:58.4 kDa
純度:>95% CRM197 by SE-HPLC or RP-HPLC or SDS-PAGE
內(nèi)毒素:<100 EU/mg of protein by LAL method
二聚物:<5%
**重組CRM197(bulk)產(chǎn)品是根據(jù)現(xiàn)行cGMP生產(chǎn)規(guī)范和ICH Q7和ICH Q11(視情況而定)指導(dǎo)原則制造的,重組CRM197(bulk)作為活性物質(zhì)起始材料,用于終用戶進(jìn)一步制造合適的原料藥和/或藥品
實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)
產(chǎn)品特點(diǎn)
(1)避免了在病原微生物中緩慢,復(fù)雜和昂貴的生產(chǎn)
(2)提供研究用和cGMP等級(jí)的重組CRM197 載體蛋白**
(3)從研究等級(jí)(mg級(jí))到cGMP等級(jí)(kg級(jí))的產(chǎn)品和工藝保持一致性
(4)加速疫苗研發(fā)進(jìn)入臨床,是疫苗開(kāi)發(fā)和商業(yè)化的經(jīng)濟(jì)有效的關(guān)鍵材料來(lái)源
(5)可提供生物制品生產(chǎn)主文件(Master File),用于支持FDA臨床監(jiān)管申報(bào)和美國(guó)以外區(qū)域的同等機(jī)構(gòu)申報(bào)
(6)應(yīng)用領(lǐng)域
疫苗開(kāi)發(fā)和生產(chǎn)
收到CRM197凍干粉后請(qǐng)保存在2-8°C。
使用前,用無(wú)菌去離子水將凍干的CRM197無(wú)菌復(fù)原至4 mg/mL的濃度 。
配置好的重組CRM197應(yīng)在2-8°C下儲(chǔ)存。
白喉毒素的兩個(gè)無(wú)毒突變體的氨基酸序列:CRM45和CRM197。
核酸研究| G Giannini,R Rappuoli和G Ratti | 1984年5月25日
摘要:從與白喉毒素相關(guān)的兩個(gè)無(wú)毒蛋白CRM45和CRM197的完整序列推導(dǎo)了它們的氨基酸序列:tox 45和tox197。CRM45缺少后149個(gè)C端氨基酸殘基,但在其他方面與白喉毒素相同:在蘇氨酸386的密碼子之后,單個(gè)C-T躍遷在毒素45中引入了“ re色”(TAA)終止信號(hào)。在毒素197中也發(fā)現(xiàn)了一個(gè)單一的G-A過(guò)渡,導(dǎo)致野生型毒素中存在的甘氨酸52被CRM197中的谷氨酸取代。這種氨基酸變化是造成CRM197中NAD:EF2 ADP-核糖基轉(zhuǎn)移酶活性喪失的原因,有可能是由于NAD +結(jié)合位點(diǎn)的改變。
Vero細(xì)胞膜中白喉毒素受體和非蛋白質(zhì)白喉毒素結(jié)合分子的鑒定
細(xì)胞生物學(xué)雜志| 作者:E. Mekada和TJ Uchida | 1988年8月1日
摘要:發(fā)現(xiàn)對(duì)DT敏感的Vero細(xì)胞的膜部分中存在兩種具有結(jié)合白喉毒素(DT)的能力的物質(zhì)。根據(jù)其與DT結(jié)合并抑制其細(xì)胞毒性作用的能力,發(fā)現(xiàn)了其中一種物質(zhì)。該抑制物質(zhì)競(jìng)爭(zhēng)性地抑制了DT與Vero細(xì)胞的結(jié)合。但是,該抑制劑不能與DT基因錯(cuò)義突變的產(chǎn)物CRM197結(jié)合,也不能抑制CRM197與Vero細(xì)胞的結(jié)合。此外,在對(duì)DT不敏感的小鼠細(xì)胞的膜級(jí)分中觀察到了相似水平的抑制活性,表明該抑制劑不是DT敏感細(xì)胞中*的DT受體。通過(guò)測(cè)定125I標(biāo)記的CRM197的結(jié)合,在同一Vero細(xì)胞膜制備物中發(fā)現(xiàn)了第二種DT結(jié)合物質(zhì)。在小鼠L細(xì)胞的膜制備中未觀察到這種DT結(jié)合活性。通過(guò)使用標(biāo)記的DT和CRM蛋白進(jìn)行的競(jìng)爭(zhēng)研究,我們得出結(jié)論,這種結(jié)合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質(zhì)表明,該抑制劑對(duì)某些RNase敏感,但對(duì)蛋白酶有抵抗力,而DT受體對(duì)RNase有抵抗力,但對(duì)蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過(guò)在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進(jìn)行部分純化。對(duì)部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。我們得出結(jié)論,這種結(jié)合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質(zhì)表明,該抑制劑對(duì)某些RNase敏感,但對(duì)蛋白酶有抵抗力,而DT受體對(duì)RNase有抵抗力,但對(duì)蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過(guò)在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進(jìn)行部分純化。對(duì)部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。我們得出結(jié)論,這種結(jié)合活性是由于DT的表面受體引起的。用幾種酶處理這些物質(zhì)表明,該抑制劑對(duì)某些RNase敏感,但對(duì)蛋白酶有抵抗力,而DT受體對(duì)RNase有抵抗力,但對(duì)蛋白酶敏感。將該受體溶解并通過(guò)在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進(jìn)行部分純化。對(duì)部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。將該受體溶解并通過(guò)在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進(jìn)行部分純化。對(duì)部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。將該受體溶解并通過(guò)在CM-瓊脂糖凝膠柱上的色譜法進(jìn)行部分純化。對(duì)部分純化的受體的免疫沉淀和蛋白質(zhì)印跡分析表明,14.5kD蛋白是DT受體,或至少是其一部分。
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