haemtech玉米胰蛋白酶抑制劑說明書
Corn Trypsin Inhibitor (CTI)
CTI對(duì)正常人血漿的APTT和PT
的影響該圖顯示了添加的CTI對(duì)正常人血漿的PT和aPTT的影響。將CTI添加到正常的人血漿中至各種終濃度,然后在進(jìn)行測(cè)定之前,將混合物在冰上孵育一小段時(shí)間。PT保持不變,而aPTT加倍,每毫升血漿中添加約60微克CTI。
尺寸 | 1毫克 |
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公式 | 20 mM Tris,150 mM NaCl,pH 7.4 |
分子量 |
貯存 | -80°攝氏度 |
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純度 | 通過SDS-PAGE,> 95% |
化合物 |
含量測(cè)定 | aPTT分析 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 12個(gè)月 |
化學(xué)式 |
尺碼 | 25 X 2毫升,25 X 3毫升,25 X 5毫升 |
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公式 | 11 mM檸檬酸鹽,50 ug / mL CTI(終) |
分子量 |
貯存 | 4°攝氏度 |
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純度 | 不適用 |
化合物 |
含量測(cè)定 | 不適用 |
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保質(zhì)期(正確存放) | 6個(gè)月 |
化學(xué)式 |
純化的CTI
玉米胰蛋白酶抑制劑(CTI)是一種小蛋白質(zhì),位于大多數(shù)玉米物種的籽粒中。在血液凝結(jié)實(shí)驗(yàn)中測(cè)試時(shí),CTI不僅是胰蛋白酶的抑制劑,還是一種特定的人因子XIIa抑制劑(1-6)。該抑制劑與胰蛋白酶或XIIa因子形成一對(duì)一的復(fù)合物,當(dāng)添加至血漿中時(shí),可延長(zhǎng)活化的部分凝血活酶時(shí)間,而不會(huì)影響PT分析(6)。XIIa因子的特異性使該抑制劑可用于分離和研究依賴組織因子(TF)的凝血反應(yīng)(6)。
在文獻(xiàn)中已證明使用CTI研究TF依賴性反應(yīng)(6,8-10)。研究表明,在嘗試在全血或血漿樣品中進(jìn)行TF依賴性測(cè)定時(shí),必須抑制凝血的接觸途徑。在樣品收集點(diǎn)添加CTI可以防止在隨后的樣品處理步驟中激活接觸途徑,從而減少了體外偽影。當(dāng)嘗試在低TF濃度下工作時(shí),CTI的常見用途與凝血酶生成測(cè)定相關(guān)。HTI的CTI產(chǎn)品已針對(duì)此特定應(yīng)用進(jìn)行了性能測(cè)試。
該蛋白質(zhì)由112個(gè)氨基酸組成,計(jì)算得出的分子量為12,028(7)。計(jì)算的分子量與通過純化蛋白質(zhì)的沉降平衡分析確定的分子量(12,500)非常吻合(3)。CTI氨基酸序列與其他胰蛋白酶或絲氨酸蛋白酶抑制劑的氨基酸序列比較發(fā)現(xiàn)幾乎沒有相似性(7)。
CTI使用已公開程序的組合進(jìn)行純化(3,4)。為了開始純化過程,將CTI從新鮮甜玉米的籽粒中提取到生理緩沖液中。然后使用丙酮對(duì)提取物進(jìn)行脫脂,并通過凝膠過濾和離子交換色譜法進(jìn)一步純化蛋白質(zhì)。通過SDS-PAGE分析,終的CTI制劑在還原和非還原條件下均顯示為單個(gè)譜帶。
測(cè)試了CTI制劑延長(zhǎng)aPTT分析而不影響PT分析的能力。確定每批CTI的比活度,將一個(gè)單位定義為將正常人血漿的aPTT加倍所需的CTI量。
純化的CTI是在20 mM Tris,0.15 M NaCl,pH 7.4中配制的,應(yīng)在-20°C或更低溫度下冷凍保存。
采血管
為了簡(jiǎn)化添加CTI的樣本采集過程,HTI開發(fā)了包含CTI的采血管。這些管(我們的SCAT-27系列)允許您將血液直接吸到含有CTI的抗凝劑上,從而簡(jiǎn)化了進(jìn)行TF依賴性研究的過程。您可以選擇使用我們的標(biāo)準(zhǔn)CTI /檸檬酸鹽配方(11mM檸檬酸鹽,50 ug / mL CTI),也可以創(chuàng)建自己的定制配方。HTI的采血管不是無菌的,其制造和銷售僅供研究使用。盡管可以為您定制尺寸,但仍提供三種標(biāo)準(zhǔn)尺寸。
SCAT-27-4.5 / 5-5毫升管
SCAT-27-2.7 / 5-3 mL試管
SCAT-27-1.8 / 5-2毫升管
凝膠 | Novex 4-12%Bis-Tris | |||||||||||||||
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加載 | 玉米胰蛋白酶抑制劑,每泳道1 µg | |||||||||||||||
緩沖 | MES | |||||||||||||||
標(biāo)準(zhǔn) | 參見BluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脫氫酶(49 kDa),酒精脫氫酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌紅蛋白紅(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6 kDa),胰島素,B鏈(3 kDa)。
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