invivogen提供了廣泛的試劑,工程細(xì)胞系和測(cè)定試劑盒,可滿足您對(duì)先天免疫和哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的研究需求。
對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng),我們提供微生物污染的解決方案,以及選擇性抗生素和內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒。
我們還提供了一個(gè)擴(kuò)展的報(bào)告細(xì)胞系集合,以監(jiān)測(cè)由細(xì)胞因子或模式識(shí)別受體(PRR)配體誘導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)途徑。
對(duì)于主要的PRR信號(hào)通路,我們提供相關(guān)配體,抑制劑和抗體的家族。
此外,我們提供了多種人類和鼠類基因,細(xì)胞啟動(dòng)子以及用于不同應(yīng)用的克隆和表達(dá)載體的選擇。
用表達(dá)GFP的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染THP-1細(xì)胞
細(xì)胞轉(zhuǎn)染包括將“外源”核酸(例如質(zhì)?;騭iRNA)引入細(xì)胞中,以分別過(guò)表達(dá)或沉默目的基因。轉(zhuǎn)染可以在各種細(xì)胞環(huán)境中對(duì)特定基因的表達(dá)進(jìn)行功能評(píng)估。根據(jù)核酸的類型以及細(xì)胞的類型,可以使用許多不同的轉(zhuǎn)染方案。轉(zhuǎn)染的三種主要方法是化學(xué)的(例如陽(yáng)離子脂質(zhì)),物理的(例如電穿孔)和生物的(例如病毒轉(zhuǎn)導(dǎo))。新引入的核酸可以是瞬時(shí)存在的,從而該基因僅在有限的時(shí)間段內(nèi)表達(dá)而不能復(fù)制,也可以穩(wěn)定地存在,由此該基因整合到受體細(xì)胞的基因組中。細(xì)胞轉(zhuǎn)染后
仍難以轉(zhuǎn)染的細(xì)胞(例如免疫細(xì)胞)通常會(huì)表達(dá)能檢測(cè)外源核酸的強(qiáng)效胞質(zhì)傳感器。因此,需要轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑或加強(qiáng)劑來(lái)禁用這些防御,從而有助于促進(jìn)核酸表達(dá)并大大提高轉(zhuǎn)染成功率。
InvivoGen提供:
LyoVec™ | 單位大小 | 貨號(hào) |
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用于轉(zhuǎn)染哺乳動(dòng)物細(xì)胞的陽(yáng)離子脂質(zhì)+ 1小瓶的對(duì)照LyoVec™-GFP / SEAP復(fù)合物 | 8ml,160次反應(yīng) 10毫升,200次反應(yīng) 18毫升,360次反應(yīng) 20 ml,400次反應(yīng) 16毫升,320反應(yīng) | LYEC-12 |
LyoVec™是一種專有的基于陽(yáng)離子脂質(zhì)的轉(zhuǎn)染試劑,屬于磷脂家族。該家族最初被Floch等人描述為在體外和體內(nèi)使用的有效轉(zhuǎn)染試劑[1-2]。
LyoVec™的主要成分是磷脂DTCPTA,它與DiPPE偶聯(lián),DiPPE是一種中性脂質(zhì),有助于使膜雙層穩(wěn)定并提高LyoVec™的體外轉(zhuǎn)染效率。
如何使用LyoVec™
磷脂的正電荷可使LyoVec™與質(zhì)粒DNA結(jié)合,并且該結(jié)構(gòu)可促進(jìn)與細(xì)胞膜的融合,從而實(shí)現(xiàn)有效的DNA傳遞。
另外,LyoVec™可用作核酸絡(luò)合劑,以促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)入RNA或基于DNA的寡核苷酸,例如RIG-1配體(例如poly(dA:dT)[3]和poly(I:C) [4])和內(nèi)體TLR7 / 8配體(例如ssPolyU [5])。該復(fù)合步驟對(duì)于通過(guò)病原體識(shí)別受體誘導(dǎo)對(duì)核酸的有效應(yīng)答是至關(guān)重要的。
參考
1. Floch等人, 1997。陽(yáng)離子磷脂作為非病毒載體,可在造血細(xì)胞系和CD34 +細(xì)胞中進(jìn)行DNA轉(zhuǎn)染。血細(xì)胞分子與疾病23:69-87。
2. Guillaume-Gable等, 1998。陽(yáng)離子磷脂作為小鼠肺中非病毒基因轉(zhuǎn)移劑。嗡嗡聲基因The 9:2309-2319。
3. Xie M.等人, 2016。依賴PKM2的糖酵解促進(jìn)NLRP3和AIM2炎性體激活。Nat Commun。7:13280。
4.JärverP.等人, 2018。單鏈核酸通過(guò)干擾網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的胞吞作用來(lái)調(diào)節(jié)TLR3 / 4/7活化。科學(xué)8:15841。
5.片芝等人, 2011年。人髓樣樹突狀細(xì)胞中的雙鏈DNA和單鏈RNA分別誘導(dǎo)了干擾素-α和白介素12。免疫學(xué)。132(2):165-73。
動(dòng)手時(shí)間:不超過(guò)15分鐘,轉(zhuǎn)染前一天無(wú)需任何準(zhǔn)備
轉(zhuǎn)染:瞬時(shí)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染
條件:在有血清的情況下工作,轉(zhuǎn)染后無(wú)需洗滌細(xì)胞
保質(zhì)期:質(zhì)粒DNA(pDNA)/ LyoVec™復(fù)合物的保質(zhì)期長(zhǎng)
質(zhì)量控制:
LyoVec™以凍干粉的形式提供,無(wú)菌并包裝在密封的玻璃小瓶中。
該產(chǎn)品有不同的格式:
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