牛胰腺脫氧核糖核酸酶是一種內(nèi)切核酸酶,可分裂磷酸二酯鍵,優(yōu)先與嘧啶核苷酸相鄰,產(chǎn)生在3'位具有游離羥基,在5'位具有磷酸基的多核苷酸。極限消化的平均鏈長(zhǎng)是四核苷酸。
用途:沃辛頓(Worthington)為不同應(yīng)用提供不同純度的DNase。產(chǎn)品代碼:DPRF和DPRFS都是專門為分子生物學(xué)應(yīng)用設(shè)計(jì)的,并且含有低水平的RNase和蛋白酶活性。它們都適合用于在完整的RNA回收中需要DNA消化的技術(shù)中,或必須保持結(jié)構(gòu)蛋白或酶的完整性的技術(shù)中。應(yīng)用包括缺口翻譯,DNA定位,核RNA和蛋白質(zhì)的分離,質(zhì)粒構(gòu)建以及RNA探針和RT-PCR的RNA聚合酶合成。DNase還用于組織培養(yǎng)工作,以從受損細(xì)胞中消化DNA,從而降低粘度并去除膜結(jié)合的DNA片段。沃辛頓代碼:DP和DCLS適用于這些應(yīng)用。
穩(wěn)定性/儲(chǔ)存性:正確存放后,所有等級(jí)的沃辛頓脫氧核糖核酸酶都可以穩(wěn)定2-3年。所有等級(jí)的沃辛頓DNA酶的建議存儲(chǔ)溫度為2-8°C。產(chǎn)品代碼DPRFS可以存儲(chǔ)在-20°C下。為了長(zhǎng)期保存在溶液中,可以將產(chǎn)品代碼D和DPFF溶于5mM乙酸鹽,1mM鈣,pH 4.5中,并以單次使用的等分試樣在-20°C或-70°C下保存長(zhǎng)達(dá)一年。僅凍結(jié)并融化一次;解凍后的等分試樣至少要穩(wěn)定冷凍幾周。添加50%的甘油將在-20°C保持液態(tài),而不會(huì)影響穩(wěn)定性,并且可以去除50%甘油中的物質(zhì),并反復(fù)回到-20°C。由于缺乏蛋白酶,DPRF非常穩(wěn)定。要在重構(gòu)后長(zhǎng)期保存DPRF,請(qǐng)使用水或pH 4.0至9.0以外的任何緩沖液(磷酸鹽除外);避免鈣螯合劑;加入50%甘油,在-20°C下以液體形式存儲(chǔ);分裝在一次性容器中;只凍結(jié)和融化一次;解凍后的等分試樣至少要穩(wěn)定冷凍幾周。
單位定義:1當(dāng)作用于pH 5.0的高度聚合的DNA時(shí),在260 nm處的吸光度每分鐘每毫升0.001導(dǎo)致增加0.001每分鐘。 注意:其他供應(yīng)商報(bào)告的Kunitz單位可能比在Worthington測(cè)量的Kunitz單位高2到4倍。如在沃辛頓(Worthington)測(cè)得的,一個(gè)Kunitz單元在50µl反應(yīng)中于37°C在50mM Tris,1mM Mg 2 +,1mM Ca 2 +,pH 7.8中于10分鐘內(nèi)消化1µgλDNA 。對(duì)于其他DNA和緩沖液系統(tǒng),消化單位與Kunitz單位的相關(guān)性是不同的。
技術(shù)說明:產(chǎn)品代碼DPRF:每10,000單位DNase I,每個(gè)樣品瓶包含約2mg甘氨酸和2µmoles鈣。將整個(gè)樣品瓶溶于5ml可提供相當(dāng)于1 mg / ml的溶液。
相關(guān)產(chǎn)品:
白蛋白,無核酸酶(BSANF)
脫氧核糖核酸酶II(HDA / HDAC / HDACS)
E•RASE RNase A / T1共混物(RCT)
組蛋白(H,NHL)
溶菌酶(LY / LYSF)
核酸酶,微球菌(NFCP)
核酸酶,S1( SINUC / SINUCL)
核酸,DNA,大腸桿菌,λ/片段,RNA
磷酸酶,堿性(CAP / BAPF / BAPC / BAPSF / PC)
磷酸二酯酶I(VPH)
磷酸二酯酶II(SPH)
蛋白酶K(PROK / PROKS)
反向轉(zhuǎn)錄酶,重組HIV(RTHIV)
核糖核酸酶A(R / RAF / RASE / RS / RPDF)
核糖核酸酶T1,無動(dòng)物源(RT1S)