avidity BirA 生物素說(shuō)明書(shū)
BirA 生物素-蛋白質(zhì)連接酶通過(guò) ATP 中間體(生物素 5'-腺苷酸)以高效和有針對(duì)性的方式將 d-生物素共價(jià)添加到生物素受體肽/蛋白質(zhì)上。該試劑盒包含 300 µg BirA 酶,適用于需要更大規(guī)模反應(yīng)或在工作中更頻繁使用 BirA 生物素化反應(yīng)的人員。
請(qǐng)注意:我們強(qiáng)烈建議使用 AviTag 氨基酸序列而不是其他生物素化肽序列。BirA 酶以 2 倍于天然底物 (BCCP) 的反應(yīng)速率對(duì) AviTag 序列進(jìn)行生物素化,并且與使用的其他肽序列相比,其反應(yīng)速率可達(dá)到一個(gè)數(shù)量級(jí)或更高。與其他多肽生物素化序列相比,AviTag™ 需要更少量的酶和更短的孵育時(shí)間,從而最大限度地減少與蛋白酶和蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性相關(guān)的輔助問(wèn)題。
套件作為:
BirA 生物素-蛋白質(zhì)連接酶 (EC 6.3.4.15) 通過(guò) ATP 中間體(生物素 5'-腺苷酸)以高效且有針對(duì)性的方式將 d-生物素與生物素受體肽/蛋白質(zhì)共價(jià)添加。酶促生物素化蛋白質(zhì)的下游應(yīng)用是多種多樣的、重要的和強(qiáng)大的。生物素-親和素/鏈霉親和素相互作用經(jīng)常被用于親和層析或蛋白質(zhì)固定在表面或底物上。通過(guò)抗生物素抗體或親和素/鏈霉親和素-報(bào)告酶偶聯(lián)物(-HRP、-堿性磷酸酶)或熒光探針進(jìn)行蛋白質(zhì)檢測(cè)成為可能。生物素化 MHC 分子的多聚體形式是免疫生物學(xué)中的常用工具。
當(dāng)與我們的 AviTag™ 生物素受體肽氨基酸序列結(jié)合使用時(shí),生物素化發(fā)生的速度是天然大腸桿菌 BCCP 底物的兩倍,與其他肽序列的生物素化相比,其發(fā)生率高出一個(gè)數(shù)量級(jí)或更多。因此,與其他可用序列相比,AviTag™ 序列需要更少的 BirA 酶和更短的孵育時(shí)間來(lái)完成生物素化。如果蛋白質(zhì)不穩(wěn)定性或蛋白酶活性是一個(gè)問(wèn)題,這可能對(duì)下游的成功很重要。
我們的 BirA 酶是大腸桿菌野生型,由 birA 基因編碼,并通過(guò)傳統(tǒng)方法純化至 99% 以上的純度。
這種酶的其他名稱包括:生物素連接酶;生物素操縱子阻遏蛋白;比拉; 生物素全酶合成酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;生物素-[乙酰輔酶A-羧化酶]連接酶;生物素-[乙酰輔酶A羧化酶]合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;乙酰輔酶A全羧化酶合成酶;生物素:脫羧酶連接酶;生物素全酶合成酶;HCS。
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