genaxxon M3009.0250說(shuō)明書(shū)
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SNP Pol DNA 聚合酶,用于簡(jiǎn)單、可靠和快速的等位基因特異性鑒別,例如。CRISPR / Cas9 點(diǎn)突變,用于檢測(cè)不正確的 CRISPR / Cas9 產(chǎn)品,或驗(yàn)證測(cè)序結(jié)果。SNP Pol DNA 聚合酶具有高度特異性,無(wú)論是否存在引物-模板-復(fù)合物的錯(cuò)配。錯(cuò)配(點(diǎn)突變)必須位于引物的 3' 端。因此,突變等位基因可以與野生型等位基因準(zhǔn)確區(qū)分開(kāi)來(lái)——無(wú)需測(cè)序,因?yàn)榫酆厦冈阱e(cuò)配的情況下根本不會(huì)擴(kuò)增。
只需將您的引物放在假定的點(diǎn)突變上(重要:點(diǎn)突變必須在 3' 末端),聚合酶將以幾乎 100% 的準(zhǔn)確度檢測(cè)該區(qū)域的錯(cuò)配:如果模板堿基與 3' 末端互補(bǔ)引物顯示突變,而引物沒(méi)有,不會(huì)發(fā)生擴(kuò)增 - 短時(shí)間內(nèi) 100% 確定!
因此,SNP Pol DNA 聚合酶可以輕松、省時(shí)且經(jīng)濟(jì)高效地用于點(diǎn)突變的篩選。
變體SNP PolTaq DNA 聚合酶 >具有 5'-3' 核酸酶活性,因此可用于特定水解探針,例如 Taqman® 探針或分子信標(biāo)。
以*提供測(cè)試樣品!德國(guó)境內(nèi)無(wú)運(yùn)費(fèi)。測(cè)試樣品價(jià)格將在產(chǎn)品的第一個(gè)正式訂單中退還。
說(shuō)明
SNP波爾DNA聚合酶>(您好GH狄單核苷酸scrimination) 是一種高度選擇性的 DNA 聚合酶。它專(zhuān)為需要高鑒別率的等位基因特異性鑒別而開(kāi)發(fā):例如在等位基因特異性 PCR (ASA; AS-PCR)、等位基因特異性引物延伸 (AS-PEX)、SNP 分析、基因分型或甲基化- 特異性 PCR (MSP)。許多其他 DNA 聚合酶耐受錯(cuò)配的引物-模板復(fù)合物,因此不適合。另一方面,SNP Pol DNA 聚合酶專(zhuān)門(mén)區(qū)分這些(高辨別力)并僅提供具有匹配引物對(duì)的 PCR 產(chǎn)物!Genaxxon SNP Pol 和 SNP PolTaq DNA 聚合酶通過(guò)兩個(gè)等位基因之間的等位基因特異性 PCR 差異高達(dá) 100%,并且在簡(jiǎn)單的 qPCR 后,給出關(guān)于存在哪個(gè)等位基因的明確結(jié)果。因此,
等位基因特異性 PCR 可用于量化野生型序列庫(kù)或背景中的突變率。NGS確定的突變頻率的驗(yàn)證 也可以通過(guò)等位基因特異性 PCR 和 SNP Pol DNA 聚合酶來(lái)驗(yàn)證。SNP PolTaq DNA 聚合酶非常適用于液體活檢 樣品的分析 。使用 SNP PolTaq,可以很好地分析和量化癌癥突變的存在和頻率。
下圖:應(yīng)用說(shuō)明 SNP Pol DNA 聚合酶
我們建議設(shè)計(jì)具有較短擴(kuò)增子長(zhǎng)度(約 60-200 bp)的引物以獲得最佳結(jié)果,但更長(zhǎng)的擴(kuò)增子長(zhǎng)度也是可能的。如果更長(zhǎng)的擴(kuò)增子 > 500 bp,可能需要添加額外的鎂 (+0.5 - 1.5mM)。
SNP Pol DNA 聚合酶(M3009 >或M3061 >)可與非特異性熒光染料(例如 Genaxxon's Green DNA Dye >或 SybrGreen®)一起用于實(shí)時(shí) PCR。當(dāng)使用特定的 PCR 探針時(shí),只能使用 SNP PolTaq DNA 聚合酶,因?yàn)橹挥兴鼈兙哂?5'-3' 核酸外切酶活性。
憑借我們的高品質(zhì) dNTPs Set (M3015.4100) >或Mix (M3016.1010) >或我們的DNA Ladders >以及我們有利的標(biāo)準(zhǔn)瓊脂糖 (M3044) >我們可以為您的 PCR 提供其他產(chǎn)品。
SNP Pol DNA 和 SNP Pol DNA 聚合酶的應(yīng)用領(lǐng)域
- 點(diǎn)突變的監(jiān)測(cè)、驗(yàn)證和檢測(cè)
- 識(shí)別正確或錯(cuò)誤的 CRISPR/Cas9 產(chǎn)品
- 測(cè)序結(jié)果的驗(yàn)證/驗(yàn)證
- 突變的量化(例如 NGS 結(jié)果)
- SNP 檢測(cè)通過(guò)等位基因特異性擴(kuò)增 (ASA) / 等位基因特異性 PCR
- 亞硫酸氫鹽處理的 DNA(CpG 甲基化側(cè))后的甲基化特異性 PCR (MSP)
- HLA 基因分型
- 微測(cè)序
- 使用水解探針的實(shí)時(shí) PCR
- 實(shí)時(shí)多重 PCR
- 秀麗隱桿線蟲(chóng)中的 DamID-seq 數(shù)據(jù)。
作為 ChIP 的替代方案,最近顯示通過(guò)測(cè)序鑒定 DNA 腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶 (DamID-seq) 能夠表征單個(gè)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的結(jié)合位點(diǎn)。此外,DamID 可以通過(guò)在組織特異性啟動(dòng)子下以受控方式表達(dá) Dam 融合蛋白來(lái)實(shí)現(xiàn)細(xì)胞類(lèi)型特異性分析。在本報(bào)告中,我們提出了一個(gè)用戶友好的管道來(lái)分析秀麗隱桿線蟲(chóng)中的 DamID-seq 數(shù)據(jù)。
Sharma R、Ritler D、Meister P.
秀麗隱桿線蟲(chóng)發(fā)育過(guò)程中核組織 DNA 腺嘌呤甲基轉(zhuǎn)移酶鑒定分析的工具。創(chuàng)世紀(jì)。2016 年 2 月 4 日。doi:10.1002/dvg.22925。
- 使用 SNPase DNA 聚合酶進(jìn)行 SNP 基因分型的微量測(cè)序可以通過(guò)以下描述的程序進(jìn)行:
Lovmar L、Fredriksson M、Liljedahl U、Sigurdsson S、Syv?nen AC。
通過(guò)微型測(cè)序和微陣列進(jìn)行的定量評(píng)估揭示了全基因組擴(kuò)增 DNA 的準(zhǔn)確多重 SNP 基因分型。核酸研究。2003;31:e129。
- HiDi DNA 聚合酶的等位基因特異性錯(cuò)配選擇性
Drum M、Kranaster R、Ewald C、Blasczyk R、Marx A (2014) 在等位基因和甲基化特異性擴(kuò)增中具有更高選擇性的水生棲熱菌 DNA 聚合酶變體。PLoS 一 9(5):e96640。doi:10.1371/journal.pone.0096640
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