advancedbiomatrix PureCol說明書
目錄 #5005
PureCol ®是一種 3 mg/ml 的 I 型牛去端膠原溶液,用于 2D 和 3D 細胞培養(yǎng),或作為膠原蛋白標(biāo)準(zhǔn)品。PureCol ®被稱為膠原蛋白產(chǎn)品的純度標(biāo)準(zhǔn)(≥99.9% 的膠原蛋白含量)、一致性和可重復(fù)性,并被超過 2000 篇出版物引用
PureCol ®膠原蛋白被稱為所有膠原蛋白的純度標(biāo)準(zhǔn)(> 99.9% 的膠原蛋白含量)、功能性和最天然的膠原蛋白。PureCol ®是從來自美國受控的封閉畜群的牛皮中分離出來的。Advanced BioMatrix 的制造工藝符合嚴(yán)格的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),這些標(biāo)準(zhǔn)已被證明可以產(chǎn)生批次間一致性。
PureCol ®膠原蛋白含有大約 97% 的 I 型去端膠原蛋白,其余由 III 型膠原蛋白組成。PureCol ®膠原蛋白的供應(yīng)濃度約為 3 mg/ml。每個特定批次的濃度都在分析證書上提供,該證書可在購買每種產(chǎn)品時獲得。PureCol ®是在 0.01 N HCl 中可溶的去端膠原蛋白,因此 pH 值為 2。 PureCol ®膠原蛋白是理想的表面涂層,為培養(yǎng)細胞提供薄層制備,或用作固體凝膠。
PureCol ®膠原蛋白以用戶友好的包裝形式提供,便于使用和儲存。PureCol ®經(jīng)過無菌過濾,并作為即用型溶液提供。
參數(shù)、測試和方法 | PureCol ® I 型膠原蛋白 #5005 |
滅菌方法 | 過濾 |
提取方法 | 酶 - 去端膠原 |
形式 | 解決方案 |
包裝尺寸 | 100 毫升、1000 毫升 |
貯存溫度 | 2-10°C |
保質(zhì)期 | 自收到之日起至少 6 個月 |
膠原蛋白濃度 - 雙縮脲 | 2.9-3.2 毫克/毫升 |
膠原蛋白純度 - 銀染 | > 99.9% |
酸堿度 | 1.9-2.1 |
動力學(xué)凝膠測試(分鐘) | < 40 |
凝膠形成管測試(分鐘) | < 40 |
原纖維生成(吸光度單位) | > 0.5 |
電泳圖案 - 考馬斯藍 | 特征 |
無菌 - USP 修改 | 沒有增長 |
內(nèi)毒素 - 鱟 | < 1.0 歐盟/毫升 |
滲透壓 (mOsmo H2O/kg) | < 35 |
細胞附著試驗 | 經(jīng)過 |
資源 | 牛皮 |
水凝膠楊氏模量 E (Pa) | 特征 |
涂裝程序
注意:使用這些建議作為指導(dǎo)來確定適合您的培養(yǎng)系統(tǒng)的最佳包被條件。
從瓶子中取出所需數(shù)量的膠原蛋白并分配到稀釋容器中。
將 PureCol ® 在水中稀釋至 ~50 至 100 µg/ml (~1:30)。也可以使用 0.01 N HCl 溶液。
輕輕旋轉(zhuǎn)內(nèi)容物,直到材料*混合。
將適量稀釋的 PureCol ® 材料添加到培養(yǎng)表面,確保整個表面都被包被。
在室溫下孵育,蓋上蓋子 1-2 小時。吸出任何剩余的材料。或者,在室溫下孵育直至表面干燥。
用無菌培養(yǎng)基或 PBS 仔細沖洗涂層表面,避免刮傷表面。
涂層表面已準(zhǔn)備好使用。如果保持無菌狀態(tài),它們也可以在 2-10°C 潮濕或風(fēng)干的條件下儲存。
3-D 凝膠制備程序
將 1 份冷凍的 10X PBS 或 10X 培養(yǎng)基緩慢加入 8 份冷凍膠原蛋白溶液中,輕輕旋轉(zhuǎn)。
使用無菌 0.1 M NaOH 將混合物的 pH 值調(diào)節(jié)至 7.0–7.5。仔細監(jiān)測 pH 調(diào)節(jié)(pH 計、酚紅或 pH 試紙)。
用無菌水將最終體積調(diào)整為總共 10 份。
為防止凝膠化,將混合物的溫度保持在 2–10° C。
要形成凝膠,請加熱至 37°C。讓凝膠形成大約 90 至 120 分鐘。
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