cube-biotech他的親和力樹脂和磁珠說明書
更新時(shí)間:2022-09-27 點(diǎn)擊次數(shù):795
cube-biotech他的親和力樹脂和磁珠說明書
多組氨酸標(biāo)簽/Poly-His-標(biāo)簽是應(yīng)用廣泛的蛋白質(zhì)親和標(biāo)簽。由于其只有六個(gè)氨基酸的小尺寸,它很少干擾蛋白質(zhì)的功能。此外,它在天然和變性條件下的低免疫原性和多功能性突出了這種蛋白質(zhì)標(biāo)簽。His-tag 的基本純化原理是金屬離子與組氨酸咪唑環(huán)之間的相互作用。
His-tag 純化樹脂和磁珠:
選擇正確類型的 His-tag 純化樹脂或磁珠基于三個(gè)因素:
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配體:這是金屬離子在螯合劑復(fù)合物中偶聯(lián)的分子(見圖 1)。
Cube Biotech 提供三種不同的配體。
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NTA:次氮基三乙酸是常用的配體。它與鎳的螯合劑絡(luò)合物如圖 1 所示。
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IDA:亞氨基二乙酸是第二常用的一種。單擊此處了解IDA 和 NTA 之間的區(qū)別。
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INDIGO:這種配體是在 Cube Biotech 開發(fā)的。它的優(yōu)點(diǎn)之一是大大提高了 DTT 和 EDTA 耐受性。單擊此處了解有關(guān) INDIGO的更多信息。
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偶聯(lián)的金屬離子:取決于與配體偶聯(lián)的金屬離子,His 標(biāo)簽純化的親和力和特異性會(huì)發(fā)生變化。經(jīng)驗(yàn)法則:蛋白質(zhì)產(chǎn)量越高,純化的特異性越低。圖 2 給出了用于 His-tag 純化的常用金屬離子的親和力/特異性比率的一個(gè)概覽。
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珠子的大?。菏褂玫闹樽又睆皆酱螅現(xiàn)PLC 純化的流速越高。然而,具有較慢的流速通常會(huì)增加蛋白質(zhì)產(chǎn)量。我們提供 30 µm、40 µm、100 µm 和 XL 尺寸(~400 µm)的珠子直徑??筛鶕?jù)要求提供更多尺寸。參見圖 3 以供參考。
His-tag 親和樹脂和 MagBeads 的詳細(xì)信息:
圖 1:由 NTA 和鎳2+組成的螯合劑復(fù)合物的示意圖。該鎳離子與添加到蛋白質(zhì)中的 His 標(biāo)簽的兩個(gè)咪唑環(huán)結(jié)合。
圖 2:His 標(biāo)簽蛋白純化中常用的金屬離子概述。銅的親和力高,而特異性低。鈷標(biāo)志著光譜的另一端。鎳是常用的金屬離子,在親和力和特異性之間具有良好的平衡。
產(chǎn)品信息“PureCube 100 INDIGO Ni-Agarose”
類型: | 瓊脂糖 |
珠子大?。?/span> | 100 µm(瓊脂糖) |
親和力: | 他的標(biāo)簽 |
目的: | 蛋白質(zhì)純化 |
配體: | 靛青 |
耦合離子: | Ni2+ |
PureCube 100 INDIGO-Ni 瓊脂糖樹脂是 Cube Biotech 為高質(zhì)量的 His-tag 蛋白質(zhì)純化而開發(fā)的產(chǎn)品。其目的是創(chuàng)造一種瓊脂糖樹脂,能夠承受高濃度的螯合劑,如 EDTA 和 DTT,這些螯合劑在哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)緩沖液中很常見。得到的 INDIGO 配體具有 20 mM 的 DTT 和 EDTA 公差。這遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于其他競(jìng)爭(zhēng)樹脂。INDIGO-Ni 也可用作磁珠或預(yù)裝在墨盒/柱中。