ampliqon PCR緩沖液簡(jiǎn)介
一個(gè)最佳的緩沖系統(tǒng)對(duì)于成功進(jìn)行PCR至關(guān)重要??煽康腜CR結(jié)果取決于許多因素:DNA和引物的質(zhì)量以及PCR儀器本身。
Ampliqon開(kāi)發(fā)了不同的基于Tris的緩沖溶液,以滿(mǎn)足PCR應(yīng)用中的不同要求。緩沖液通常以包含15mM MgCl2的10x配方提供。Ampliqon緩沖液也不含Mg2+和Tween 20。
通過(guò)在A(yíng)mpliqon的DNA聚合酶產(chǎn)品中選擇合適的DNA聚合酶/緩沖液組合或基于緩沖液的最佳Master Mix,可以實(shí)現(xiàn)緩沖液的便利性和用戶(hù)靈活性。所有Ampliqon DNA聚合酶和主混合物都有不同的緩沖液選項(xiàng),可以輕松選擇DNA聚合酶和緩沖液的正確組合或正確的主混合物,以匹配不同的PCR應(yīng)用和PCR檢測(cè)條件。
PCR緩沖液
10倍銨緩沖液
大多數(shù)PCR應(yīng)用推薦使用銨緩沖液。這導(dǎo)致PCR產(chǎn)物的高產(chǎn)率,并將優(yōu)化Mg2+濃度或退火溫度的需要降低。
特征
促進(jìn)大多數(shù)DNA模板的擴(kuò)增
高產(chǎn)量
高度特異性
底漆退火溫度公差
10倍緩沖器
有4種配方:
15mM MgCl2,
無(wú)Mg2+
不含吐溫
無(wú)Mg2++無(wú)吐溫
說(shuō)明
銨緩沖液在廣泛的退火溫度和Mg2+濃度范圍內(nèi)促進(jìn)高特異性。銨緩沖液在處理困難的模板時(shí)也很有效,例如富含GC的DNA序列。
提示-選擇正確的緩沖區(qū)
如果您需要在PCR設(shè)置中優(yōu)化Mg2+濃度,特別是如果您的應(yīng)用要求Mg2+濃度低于1.5mM,建議使用無(wú)Mg2+緩沖液。
無(wú)洗滌劑緩沖液推薦用于自動(dòng)化和涉及熒光光譜的下游應(yīng)用。
AMPLIQON-PCR緩沖系統(tǒng)的性能
銨緩沖液:最少需要優(yōu)化。
大范圍的Mg2+濃度和溫度導(dǎo)致特定產(chǎn)品的高產(chǎn)率(1.5-2.5車(chē)道和57-66車(chē)道)
標(biāo)準(zhǔn)緩沖區(qū):需要優(yōu)化。
Mg2+濃度和溫度的窄范圍導(dǎo)致特定的產(chǎn)物。(1.5-2.0車(chē)道和60-66車(chē)道)
組合緩沖區(qū):需要優(yōu)化。
Mg2+濃度和溫度的窄范圍導(dǎo)致特定產(chǎn)品的高產(chǎn)率。(1.5車(chē)道和60-66車(chē)道)
ENG9.TEMPase和所示緩沖液的PCR擴(kuò)增實(shí)例在所示Mg2+濃度或溫度下使用。第一部分顯示了60°C下0.5-4.5 mM MgCl2的Mg2+稀釋系列。第二部分顯示了1.5 mM MgCl2下51-66°C的溫度梯度。M:標(biāo)記。
10x Ammonium Buffer
A301103 3 x 1.5 ml
A301110 10 x 1.5 ml
A301156 6 x 5 ml
A301203 3 x 1.5 ml
A301210 10 x 1.5 ml
A301256 6 x 5 ml
A301403 3 x 1.5 ml
A301410 10 x 1.5 ml
A301456 6 x 5 ml
A301503 3 x 1.5 ml
A301510 10 x 1.5 ml
A301556 6 x 5 ml
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