clickchemistrytools DADPS Biotin Azide說明書
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該試劑包含通過含有可裂DADPS接頭的間隔臂連接到疊氮化物部分的生物素部分在溫和的條件下(10%甲酸,0.5 h),捕獲的生物分子可以被有效地釋放,并且小分子片段(143 Da)在切割后留在標記的蛋白質(zhì)上。
鏈露親和泰、生物素相互作用的非凡強度允許有效捕獲基至高度稀釋的目標;然而,這使得以親和樹脂中回收蛋白質(zhì)具有挑性,從固定化抗生物素蛋白中洗脫生物素化蛋白質(zhì)的常規(guī)方法包括下:通過在可能包含高濃度離液鹽的變性緩中液中煮沸樹脂使鏈毒抗生物素蛋白變性,(當?shù)鞍踪|(zhì)與樹脂結合時用胰蛋白酶消化蛋白質(zhì),或用時量游離生物泰洗脫蛋白質(zhì),這些方案可以通過釋放非特異性結合的蛋白質(zhì)和/或天然生物泰化的蛋白質(zhì)與標記的蛋白質(zhì)同時共洗脫污染的蛋白質(zhì),此外,這些方法中的一些會導致高水平的樹脂基膚與目標蛋白質(zhì)一起洗脫,導致進一步的樣品污染.
DADPS(二氧基二苯基磚烷生物素疊氮化物探針消除了鏈毒親和素、生物素親和純化的主要限制,該試劑包含通過含有可裂解DADPS接頭的間置連接到疊網(wǎng)化物部分的生物素部紛,在溫和的條件下5%或10%甲酸,0.5 h),捕獲的生物分子可以被有效地釋放,并且切割后小分子片段(143 Da)留在標記的蛋白質(zhì)上,這些特征使得DADPS探針在用于生物分子標記和蛋白質(zhì)組學研究中特別有吸引力。
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