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mblbio TS-0010-1C說明書

更新時(shí)間:2024-01-12      點(diǎn)擊次數(shù):373



mblbio TS-0010-1C說明書


背景


T淋巴細(xì)胞在免疫系統(tǒng)中起著核心作用。通過檢測各種細(xì)胞表面來測量總T細(xì)胞和T細(xì)胞亞群計(jì)數(shù)


分子。CD8+抗原特異性T細(xì)胞的計(jì)數(shù)需要I類MHC/肽復(fù)合物對(duì)T細(xì)胞受體(TCR)的同源識(shí)別。


這可以使用T-Select MHC I類四聚體來實(shí)現(xiàn),該四聚體由四個(gè)MHC I級(jí)分子組成與熒光蛋白綴合。因此,T-Select MHC四聚體測定允許對(duì)與特定MHC分子復(fù)合的給定肽特異性的總T細(xì)胞群進(jìn)行定量。此外,由于結(jié)合不依賴于功能途徑


群體包括與功能狀態(tài)無關(guān)的特異性CD8+T細(xì)胞??梢栽谌蚍蛛x的淋巴細(xì)胞/單核細(xì)胞制劑中進(jìn)行測量。在一些頻率較低的情況下,可能需要進(jìn)行體外細(xì)胞擴(kuò)增。




染色是通過將樣品與T-Select MHC四聚體試劑孵育,然后洗去過量的四聚體來完成的。然后通過流式細(xì)胞術(shù)測定四聚體陽性淋巴細(xì)胞的數(shù)量。


該四聚體試劑包含人類I類HLA-A*02:01和來源于CMV pp65結(jié)構(gòu)蛋白的表位肽,并且它可以通過流式細(xì)胞術(shù)檢測HLA-A*02:01限制性CMV pp65-特異性CD8+T細(xì)胞。




巨細(xì)胞病毒(CMV/HHV-5)是一種廣泛傳播的皰疹病毒,無癥狀感染大多數(shù)人。健康個(gè)體中的CMV特異性T細(xì)胞在控制CMV再激活中起著重要作用。然而,免疫功能受損個(gè)體的巨細(xì)胞病毒感染是感染發(fā)病率和死亡率的主要原因,尤其是在移植受者和感染人類免疫缺陷病毒(HIV)的人群中。CMV特異性T細(xì)胞的再生與對(duì)CMV疾病的保護(hù)之間的相關(guān)性已在接受同種異體骨移植的患者中得到證實(shí)


骨髓移植(BMT)。供體來源的CMV特異性T細(xì)胞的過繼轉(zhuǎn)移導(dǎo)致BMT患者的病毒特異性免疫恢復(fù),同時(shí)降低了病毒再激活率。使用MHC四聚體監(jiān)測CMV特異性T細(xì)胞可用于預(yù)測有復(fù)發(fā)或持續(xù)性CMV感染、CMV疾病或移植相關(guān)死亡率風(fēng)險(xiǎn)的患者。


HLA限制


HLA-A*02:01


CTL表位CMV pp65(495-503個(gè)氨基酸,NLVPMVATV)的起源和序列


試劑


500?L液體-10?L/測試


將四聚體溶解在水性緩沖液中


含有0.5mM EDTA、0.2%BSA、10mM Tris-HCl


(pH 8.0)、150mM NaCl和0.09%NaN3。


共軛物


TS-0010-1C


鏈霉親和素藻紅蛋白(SA-PE)


486-580 nm激發(fā)


發(fā)射波長為586-590 nm


TS-0010-2C


鏈親和素-別藻藍(lán)蛋白(SA-APC)


633-635 nm激發(fā)


發(fā)射波長為660-680 nm


儲(chǔ)存條件


儲(chǔ)存溫度為2至8°C。不要凍結(jié)。盡量減少曝光。小瓶標(biāo)簽上注明了有效期。



Code No. TS-0010-1C




ClassClass IAnimal speciesHuman
Categoryvirus
ConjugatePE
Immunogen (Antigen)CMV pp65
SequenceNLVPMVATV
MHC AlleleA*02:01




Citations
  1. Watanabe K, et al., CD137-guided isolation and expansion of antigen-specific CD8 cells for potential use in adoptive immunotherapy. Int J Hematol. 88: 311?|320 (2008)(PMID:18677654)

  1. Sabouri AH, et al., Impaired function of human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1)-specific CD8+ T cells in HTLV-1-associated neurologic disease. Blood 112: 2411?|2420 (2008)(PMID:18502825)

Product category
  • Research area

  • Immunology

  • Tools

  • MHC tetramer






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