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astreabioseparations——打破界限,慢病毒純化技術(shù)革新

更新時(shí)間:2024-09-06      點(diǎn)擊次數(shù):539

在生物醫(yī)藥領(lǐng)域中,基因治療被譽(yù)為下一代的醫(yī)療革命。作為基因治療的關(guān)鍵一環(huán),載體病毒的制備和優(yōu)化是決定基因治療成功與否的關(guān)鍵步驟之一。其中,慢病毒因其能夠穩(wěn)定持久地感染分裂和非分裂細(xì)胞,被廣泛用于基因治療研究中。然而,慢病毒的純化卻是一個(gè)充滿挑戰(zhàn)的技術(shù)難題。
目前,慢病毒的純化主要采用超速離心沉淀和離子交換層析的方法。然而,這些方法存在一些問題。例如,超速離心需要高轉(zhuǎn)速設(shè)備,不適于放大生產(chǎn);而離子交換方法則需要高鹽洗脫,對慢病毒活性損傷較大,收率較低。
慢病毒結(jié)構(gòu)復(fù)雜,對低pH,高鹽,溫度和剪切力非常敏感,現(xiàn)有的純化方法還存在著得率低、成本高、操作繁瑣等問題。Astrea Bioseparations推出了新型納米纖維(AstreAdept™)基質(zhì)LV純化填料LentiHERO,大大提高了感染性LV得率、速度和載量,其可放大到生產(chǎn)規(guī)模。

AstreAdept®新一代納米纖維色譜技術(shù):
AstreAdept™是一種新型納米纖維材料,不同于傳統(tǒng)凝膠介質(zhì),它能通過快速的對流模式迅速捕獲大量的目的蛋白,使得工藝運(yùn)行流速不再受限于凝膠孔徑大小。AstreAdept™平均流道直徑860nm,具有優(yōu)異的靶標(biāo)流動特性。

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LV 常規(guī)純化工藝搭配新穎的 AstreAdept®

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LentiHERO®基于AstreAdept® 納米纖維技術(shù)幫助開發(fā)建立高效純化平臺

新型LV 純化工藝——LentiHERO® Adsorbents

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澄清條件 1: 超濾換液體積優(yōu)化
比較1-3倍換液體積對感染滴度(TU),宿主蛋白(HCP)和雙鏈DNA(dsDNA)濃度的影響

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Nereus LentiHERO® 純化分析

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澄清條件 2 :離心和超濾(MWCO)

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Nereus LentiHERO® 6種澄清條件的LV純化結(jié)果:

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澄清條件 3:TFF(100kDa MWCO )和深層過濾對比

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4種澄清過濾條件下LV 純化回收率對比:

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Nereus LentiHERO® 4種澄清超濾條件LV純化結(jié)果:

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LentiHERO® 1 FPLC LV 純化案例分享
LentiHERO® 1 FPLC 純化懸浮體系LV 樣品(TFF超濾換液)

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LentiHERO® 1 FPLC可快速獲得高回收率/純度LV

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Nereus LentiHERO® 離心管到 LentiHERO® 1 FPLC 純化柱線性放大

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懸浮體系生產(chǎn)的LVV工藝放大預(yù)估:


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LentiHERO®優(yōu)勢總結(jié):
載量高、流速快,精簡純化過程
工藝溫和,回收率高
現(xiàn)有生產(chǎn)系統(tǒng)可獲得更高的產(chǎn)量
高效,無需裝柱、拆柱、測柱效

慢病毒的純化技術(shù)是CGT領(lǐng)域中的重要研究方向之一。只有通過不斷的研究和創(chuàng)新,才能夠解決當(dāng)前存在的問題,推動基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域的快速發(fā)展。


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英國Astrea Bioseparations于1987年成立,公司前身是Affinity Chromoatography Ltd,其從英國劍橋大學(xué)獨(dú)立出來專注于吸附填料的研發(fā)和生產(chǎn)。Astrea Bioseparations 公司兩大核心技術(shù)(產(chǎn)品)Mimetic ligand® 和PuraBead® 是公司產(chǎn)品的基石,迄今為止已有22個(gè)上市產(chǎn)品(FDA/EMA) 使用 Astrea Bioseparations公司的產(chǎn)品用于商業(yè)化生產(chǎn),其中不乏跨國公司和新興生物技術(shù)公司。



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