ZyGEM公司現(xiàn)推出*不同于傳統(tǒng)RNA提取的新型RNAGEM™核酸純化系列產(chǎn)品,主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大類,用于從哺乳動物細(xì)胞、激光捕獲微組織以及流式細(xì)胞檢測樣本如巨噬細(xì)胞等快速自動化提取RNA。
RNA提取實驗已經(jīng)是大家耳熟能詳?shù)幕A(chǔ)生物學(xué)實驗了,目前有關(guān)RNA提取的試劑盒產(chǎn)品也是五花八門,各具特色,我們也都知道,從原始樣本到試劑盒操作提取, 到核酸的步驟越多,無疑zui后得到的數(shù)據(jù)相對于樣本的真實性偏離得越遠(yuǎn),那么有沒有什么方法能打破這個局限性,盡量省去中間操作步驟而減少實驗誤差呢?又或許您手頭正有一批成百上千個樣本正要提取RNA用于下游實驗,但又沒有條件能用到核酸自動純化儀而且課題經(jīng)費限制不能買與之配套的昂貴的純化試劑盒。所以,有沒有既簡便又實惠的純化試劑盒能滿足以上的要求呢?現(xiàn)在,我們非??隙ǖ馗嬖V您答案:有。起福生物向您推薦Zygem公司生產(chǎn)的RNAGEM™核酸純化系列產(chǎn)品,輕松解決上述所有問題。
ZyGEM公司現(xiàn)推出*不同于傳統(tǒng)RNA提取的新型RNAGEM™核酸純化系列產(chǎn)品,主要有RNAGEM™ Tissue和RNAGEM™ Tissue Plus二大類,用于從哺乳動物細(xì)胞、激光捕獲微組織以及流式細(xì)胞檢測樣本如巨噬細(xì)胞等快速自動化提取RNA。所有的反應(yīng)均在PCR管中進(jìn)行,單管封閉操作,僅需控制溫度,整個過程只需20分鐘,中途無需過柱離心等煩瑣步驟,非常適合大規(guī)模自動化提取。所得的RNA無需純化,可直接用于RT-PCR。
一、核心技術(shù)RNAGEM™ Tissue產(chǎn)品核心技術(shù)源于Zygem公司*的酶的催化反應(yīng):EA1 蛋白酶,一種來自于新西蘭Mount Erebus環(huán)境微生物的蛋白酶。 該蛋白酶的特點:
ü 屬于金屬蛋白酶(Metalloproteinase )
Ø 在pH6.7時,具有*活性
ü 在75°C具有*蛋白酶活性
Ø 在75°C放置7天,沒有任何活性損失
Ø 在85°C的半衰期為1小時
Ø 在95°C的半衰期為10分鐘(5 mM CaCl2)
Ø 在95°C的半衰期少于1分鐘(200 µM CaCl2)
ü 95°C孵育5分鐘后,活性*喪失 ü 37°C沒有任何活性
EA1 蛋白酶與蛋白酶K的活性比較,下圖可以明顯看出,無論是在75度還是50度EA1 蛋白酶的活性遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蛋白酶K
In a 10 minute assay, Proteinase K at 50°C achieves only 3.7% of the specific activity of EA1 at 75°C.
In a 100 minute assay, this value is reduced to 2.1%
二、產(chǎn)品優(yōu)點
RNAGEM™核酸純化系列產(chǎn)品,以其簡單方便的實驗操作和高質(zhì)量的RNA得率,助您分析樣本zui真實的基因表達(dá)水平:
用于從哺乳動物細(xì)胞、激光捕獲微組織以及流式細(xì)胞檢測樣本如巨噬細(xì)胞等快速提取RNA的方法。
可實現(xiàn)快速、自動化地從細(xì)胞中提取核酸,包括RNA和DNA。
所得的RNA無需純化,即可直接進(jìn)行RT-PCR反應(yīng)。 操作步驟簡單且沒有原材料的損失, RNAGEM™ 甚至能夠從1個細(xì)胞中提取核酸。
工作流程: 其特點為:1-2-3,即1支管子,2 步反應(yīng),第3步就可以得到用于下游反應(yīng)的核酸
RNAGEM™ 是已經(jīng)優(yōu)化好的試劑混合物,能夠有效裂解細(xì)胞、去除RNAses以及水解蛋白。RNA提取過程在75°C下進(jìn)行,無需更高溫度。在使用RNAGEM™ Tissue PLUS試劑盒時,當(dāng)提取過程結(jié)束后,即加入DNAse, 37°C 5min孵育,激活DNAse;之后升溫至75°C,激活RNAGEM酶,并且水解DNAse,而無需再加入EDTA。
Ø 操作簡單:無需多步驟離心、洗滌、真空抽濾和過柱。您需要的僅僅是一臺PCR儀或溫度控制加熱器。
Ø 安全:只需要5分鐘時間的孵育即可。無需用到有毒有害試劑,如GITC、苯酚、異丙醇等,單管封閉的操作體系有效降低汽溶膠污染和操作失誤,同時也降低實驗人員暴露各種生化環(huán)境所受的危險。
Ø 高產(chǎn)率:RNAGEM™ 能夠從10-100, 000個細(xì)胞中提取RNA,甚至可以從單個細(xì)胞中提取RNA,并且包括小分子量RNA,同時保持*的線性關(guān)系
Ø 無需純化:所得的RNA可直接用于RT-PCR。
產(chǎn)品所有優(yōu)點都只為更好地應(yīng)用于科研,讓實驗變得更簡單,更省心,更安心。
ü 無需花大量時間做樣本預(yù)處理
ü 無需昂貴的大型儀器及配套試劑ü 節(jié)省大量管和槍頭的費用
ü 避免接觸苯酚等毒害試劑,健康環(huán)保
ü 操作簡便省時,可以快速進(jìn)入下游基因表達(dá)實驗,并得到100%可重復(fù)結(jié)果
ü 相比其它試劑盒RNA產(chǎn)量更高ü 提取所有RNA,包括非編碼RNA,如microRNA等
三、RNAGEM™與Trizol ®的比較
RNAGEM™與Trizol相比,無論是在實驗操作方面還是在RNA得率方面均顯示其*優(yōu)勢。Trizol方法提取需經(jīng)過裂解、洗滌、沉淀等許多步驟,但RNAGEM™卻集這些步驟為一體,只需一步孵育過程,即可得到高質(zhì)量RNA。
• RNAGEM 基因拷貝數(shù)*的線性關(guān)系,即使低拷貝的基因也是如此
• RNAGEM 對于少量細(xì)胞的樣本量也可行,即使是單個細(xì)胞。所有試劑均與RT-PCR兼容
• 對于細(xì)胞數(shù)量少的樣本,Trizol 方法明顯有不足之處,RNA得率相對較低生物通 • RNAGEM簡單封閉單管操作,適合大規(guī)模自動化
• Trizol 實驗中的一些步驟如沉淀或洗滌等很難統(tǒng)一,因此不同樣本間一致性較差
RNAGEM™ out-performs Trizol® over a wide range of cell numbers
在上圖中,不同Hela細(xì)胞數(shù)目和mRNA拷貝數(shù)的關(guān)系,可以看出RNAGEM具有*的線性,不管是對高拷貝數(shù)的mRNA (ACTB),還是低拷貝的mRNA (BRCA1)。
10-100, 000個細(xì)胞中基因拷貝數(shù)與原始細(xì)胞量保持*的線性關(guān)系 除了以上介紹的RNA快速提取試劑盒,北京吉奧生物還擁有該公司的DNA快速提取試劑盒,可以廣泛用于法醫(yī),畜牧,及基礎(chǔ)研究
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