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推薦產(chǎn)品:內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (ECGF)(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)別) |
描述: 內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(ECGF)是一種從牛大腦中提取出來的,含有能夠促進(jìn)哺乳動(dòng)物血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的因子。 也有報(bào)道稱ECGF對(duì)用于單克隆抗體生產(chǎn)的雜交瘤細(xì)胞的融合和生長(zhǎng)有一定的輔助作用。制備內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子的方法是根據(jù)Maciag等的方法(1979)修改過的,是從含有氯化鈉和硫酸鏈霉素的溶液中無菌凍干而來的。
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)可以用傳統(tǒng)的方法進(jìn)行原代培養(yǎng)。這些細(xì)胞的持續(xù)增殖已被證明是非常困難的。牛腦中的提取物可以保證這些細(xì)胞的長(zhǎng)期體外增殖。在細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中加入纖維連接蛋白或膠原基質(zhì)可以培養(yǎng)內(nèi)皮細(xì)胞。當(dāng)加入ECGF后,在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入胎牛血清的量可以減少。肝素可以提高ECGF有絲分裂的活性。 有報(bào)道稱在培養(yǎng)雜交瘤和其他類型的細(xì)胞時(shí),加入ECGF后可以不用加入飼養(yǎng)層細(xì)胞。
宿主: 牛
純化: 粗提物
緩沖液: H2O, w/o 防腐劑
形式: 凍干粉
使用說明:內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子是經(jīng)過無菌凍干的,每小瓶含6毫克蛋白。原液的配制:用2毫升預(yù)熱(37℃)的滅菌平衡鹽溶液溶解蛋白,溫和旋轉(zhuǎn)小瓶使干粉溶解。原液可進(jìn)一步用無菌組織培養(yǎng)液稀釋到所需的工作濃度。雖然原液可加入無菌組織培養(yǎng)液中,建議將稀釋的蛋白無菌過濾后使用。6毫克ECGF可以加入 500毫升的培養(yǎng)基中。
生物活性/工作濃度: 培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC),ECGFzui適宜的工作濃度是50-200 μg/ml。 加入50 μg/ml肝素后,ECGFzui適宜濃度是10 μg/ml. 作為制備單克隆抗體的輔助生長(zhǎng)因子,ECGF的zui適宜濃度是25- 100 μg/ml.
種屬的特異性: 牛ECGF 可以作用于牛,鼠和人的細(xì)胞。
保存條件:
溶解之前保存 2-8 °C。 溶解之后,溶液保存在 –20 °C。
推薦將溶解后溶液保存在 -20°C。避免反復(fù)凍融。
使用: 牛ECGF 只用于科研,不能應(yīng)用于臨床!
產(chǎn)品編號(hào): 300-090-5 規(guī)格: 5x 6 mg
參考文獻(xiàn): [Maciag T (1982) JBC 257:5333; Olander J (1980) In Vitro 6:209; Folkman J (1980) Nature 288:551; Evans CH (1982) JNCI 68:127; Pintus C (1983) J Immuno Meth 61:195; Maciag T (1979) PNAS 6:5674; Thornton SC (1983) Science 222:623; Ransom JH (1986) Methods Enzymol 121:293]
ECGF 用于HUVEC細(xì)胞培養(yǎng)
ECGF用于人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的zui適濃度范圍是100-300 μg/ml,加入肝素(50 μg/ml)后的zui適濃度范圍是10-20 μg/ml。作為一種生長(zhǎng)添加物用于單克隆抗體的生產(chǎn),zui適濃度范圍是25-100 μg/ml。牛和豬ECGF因子對(duì)小鼠細(xì)胞,牛細(xì)胞和人細(xì)胞起作用。
Protocol:
- 每孔中生長(zhǎng)培養(yǎng)基(EGM)中的細(xì)胞濃度是5-7 x 103 cells
- 隔夜培養(yǎng)細(xì)胞[如果實(shí)驗(yàn)很急,可以將早上培養(yǎng)的細(xì)胞下午進(jìn)行換液。將生長(zhǎng)培養(yǎng)基換成基礎(chǔ)培養(yǎng)基(EBM)]
- 將生長(zhǎng)培養(yǎng)基換成基礎(chǔ)培養(yǎng)基(HUVEC: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 +1-2% 胎牛血清)
- 培養(yǎng)24h
- 再次換液,加入因子 (生長(zhǎng)因子,抑制劑,等等)
- 培養(yǎng)18h
- 加入10u l 3H-胸腺嘧啶溶液[0.025mCi/ml]/孔 (=0.25u Ci)
- 37°C再培養(yǎng)6h
- 洗滌步驟:(250ul/孔)
PBS 一次
MeOH 兩次,每次5min
TCA 兩次,每次10min
H2O 一次
- 每孔加入250 ul 0.3M NaOH,裂解細(xì)胞
- 將2.5 ml ECO加入到相應(yīng)的閃爍計(jì)數(shù)瓶中
- 將細(xì)胞裂解液加入的閃爍計(jì)數(shù)瓶中
- 用閃爍液體計(jì)數(shù)(-計(jì)數(shù)器;貝克曼儀器公司)
ECGF內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子訂購(gòu)信息 |
ECGF內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子添加劑(全)用于制備500ml內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)培養(yǎng)基
With VEGF165 for microvascular endothelial cells(含VEGF165用于微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng))
產(chǎn)品名稱 | 編號(hào) | 規(guī)格 | 來源 | 價(jià)格 |
ECGFpro1 | 300-090-B | 6mg | 牛 | 1500.00 |
ECGFpro-1 +Heparin(肝素) | 300-090H-B | 6mg | 牛 | 1750.00 |
With VEGF-C for lymphatic endothelial cells(含VEGF-C用于淋巴內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng))
產(chǎn)品名稱 | 編號(hào) | 規(guī)格 | 來源 | 價(jià)格 |
ECGFpro2 | 300-090-L | 6mg | 牛 | 1875.00 |
ECGFpro2 +Heparin/肝素 | 300-090H-L | 6mg | 牛 | 2125.00 |
生物活性/工作濃度: Optimum concentration for human microvascular endothelial cells (HMEC) range from 100-300 μg/ml, optimal concentration with heparin (50 μg/ml) is at 10-20 μg/ml. Bovine ECGFpro1 and ECGFpro2 are effective on mouse, bovine and human cells. Each vial contains enough growth factor supplement and VEGF-A or VEGF-C for optimal growth conditions for blood or lymph endothelial cells.
ECGF用于人微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HMEC)培養(yǎng)的zui適濃度范圍是100-300 μg/ml,加入肝素(50 μg/ml)后的zui適濃度范圍是10-20 μg/ml。牛ECGFpro1因子和牛ECGFpro2因子對(duì)小鼠細(xì)胞,牛細(xì)胞和人細(xì)胞起作用。每瓶中含有足夠多的生長(zhǎng)因子添加物和VEGF-A或VEGF-C,可以為血液或者淋巴內(nèi)皮細(xì)胞提供zui適生長(zhǎng)環(huán)境。
產(chǎn)品名稱 | 編號(hào) | 規(guī)格 | 來源 | 價(jià)格 |
ECGF | 300-090 | 6mg | 牛 | 675.00 |
ECGF | 300-090-5 | 5x6mg | 牛 | 3075.00 |
ECGF + Heparin/肝素 | 300-090H | 6mg | 牛 | 725.00 |
ECGF + Heparin/肝素 | 300-090H-5 | 5x6mg | 牛 | 3375.00 |
ECGF | 300-092 | 6mg | 豬 | 675.00 |
ECGF | 300-092-5 | 5x6mg | 豬 | 3075.00 |
ECGF + Heparin/肝素 | 300-092H | 6mg | 豬 | 725.00 |
ECGF + Heparin/肝素 | 300-092H-5 | 5x6mg | 豬 | 3375.00 |
生物活性/工作濃度: Optimum concentration for human umbilical vein endothelial cells (HUVEC) range from 100-300 μg/ml, optimal concentration with heparin (50 μg/ml) is at 10-20 μg/ml. As a growth supplement for use in monoclonal antibody production the optimum range is 25 to 100 μg/ml. Bovine and porcine ECGF is effective on mouse, bovine and human cells.
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1:強(qiáng)大的進(jìn)口輻射能力,血清、抗體、耗材、大部分限制進(jìn)口品等。
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