簡要描述:Kapa是世界上著名的生物技術(shù)公司??偛课挥诿绹ㄊ款D, 公司的主要理念是運用分子和遺傳學(xué)技術(shù)來打造新一代的生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品。
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公司:www.kapabiosystems.com
Kapa是世界上著名的生物技術(shù)公司。總部位于美國波士頓, 公司的主要理念是運用分子和遺傳學(xué)技術(shù)來打造新一代的生物科學(xué)和醫(yī)學(xué)診斷產(chǎn)品。
Kapa公司目前主要是在“直接進(jìn)化(directed evolution technology platform)”的技術(shù)平臺上來篩選和生產(chǎn)高品質(zhì)的生物酶。目前生物醫(yī)藥領(lǐng)域所使用的大部分生物酶都只是天然存在形式,即使有些酶經(jīng)過基因工程改造,但是由于酶分子自身的結(jié)構(gòu)和功能限制,要想得到真正滿足科研工作人員需要的產(chǎn)品,卻是一件費時費力的事情,而且常常達(dá)不到預(yù)期的要求。“直接進(jìn)化”技術(shù)正是針對這一現(xiàn)實情況,運用遺傳,基因工程,生物信息學(xué)等技術(shù)來在分子水平上設(shè)計真正滿足不同實際要求的生物酶。通過創(chuàng)新,Kapa為廣大的科研人員提供了一系列擁有多項技術(shù)的產(chǎn)品,不僅能夠滿足普通科研需要,同時為高通量,基因芯片等的普及創(chuàng)造了條件。 運用“直接進(jìn)化”技術(shù),Kapa目前已經(jīng)開發(fā)出來了以下的高品質(zhì)產(chǎn)品: 1. Kapa2G*PCR (Kapa2G Robust PCR)。適用范圍:可用于普通的PCR反應(yīng)中;AT和GC堿基含量高的擴增;模板 中含有常見的PCR反應(yīng)抑制物,例如,鹽離子,尿素,SDS,乙醇,EDTA等;石蠟油包被樣品;糞便樣品;菌落PCR。 2. Kapa2G 快速PCR(Kapa2G Fast PCR)。高靈敏度,高特異性。延伸速度高達(dá)1秒/kb,(常規(guī)延伸速度是60s/kb),可擴增出長達(dá)5kb的目的片段,節(jié)省大約75%的反應(yīng)時間。 3.實時熒光定量PCR (Kapa SYBR qPCR)。和其他公司的類似產(chǎn)品相比,Kapa SYBR qPCR改造了Taq DNA多聚酶,而不是對熒光染料進(jìn)行化學(xué)改造,因此大大提高了信號強度以及反應(yīng)的有效性。更重要的是,Kapa的系列產(chǎn)品可以適用于市場上現(xiàn)有的Real-time PCR儀器。 4.Kapa長片段DNA多聚酶 (Kapa LongRange)。Kapa長片段DNA多聚酶是由Taq DNA聚合酶和修飾過的archael(B型)高保真DNA聚合酶組成的雙酶系統(tǒng)。后者含有校正功能。這種雙酶系統(tǒng)是專門為長片段和敏感PCR擴增而設(shè)計的。一般而言,普通的Taq酶由于缺少校正功能,因此隨著錯誤堿基的不斷產(chǎn)生,使得擴增過早的終止,從而大大降低了擴增效率。這也是導(dǎo)致在擴增長片段或者模板濃度很低時,使用普通Taq酶常常失敗的原因。另一方面,雖然具有校正能力的多聚酶擁有很高的正確率,但由于其3到5的外切酶活性,引物會被降解掉,從而也影響到擴增的靈敏度。Kapa長片段產(chǎn)品的原理是:在Taq DNA多聚酶中加入具有校正能力并且修飾過的多聚酶,可以使得不匹配的堿基被修正;同時,和只有校正功能的多聚酶相比,kapa的雙酶系統(tǒng)中具有校正功能的酶所占的比例較少,因此可以相對延長擴增的循環(huán)數(shù)和時間,從而提高產(chǎn)量,同時得到高保真的PCR產(chǎn)物。雖然兩種酶都有5到3的DNA聚合功能,但是只有Taq酶具有依賴于雙鏈的5到3的聚合酶活性,而只有B型DNA聚合酶具有3到5的外切酶功能(也就是校正功能)。
5.Kapa高保真DNA多聚酶 (Kapa Fidelity)。是經(jīng)過修飾的,耐熱的高保真DNA多聚酶。既有5到3的多聚酶活性,又有3到5外切校正功能,因此能夠擴增出優(yōu)質(zhì)的高保真片段。高保真:Kapa高保真DNA多聚酶的擴增出正確片段的幾率是普通Taq酶的15倍,KOD/Pfx2倍;應(yīng)用廣泛:可以擴增出長至6kb的質(zhì)粒或者lambda DNA,或者長至2kb的基因組DNA擴增;用量少:由于其高活性,和其它的高保真產(chǎn)品相比,每個反應(yīng)的用量要少,從而為實驗者節(jié)省資金;易于克?。篕apa高保真DNA多聚酶擴增出鈍頭產(chǎn)物,非常易于克?。豢焖伲簲U增速度是pfu的2-3倍。 另外,還有普通的KapaTaq DNA多聚酶,以及熱啟動酶,T4連接酶,快速連接試劑盒等產(chǎn)品。
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