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克隆載體

簡(jiǎn)要描述:克隆載體(Cloning Vector):通常采用從病毒、質(zhì)粒或高等生物細(xì)胞中獲取的DNA作為,在載體上插入合適大小的外源DNA,并注意不能破壞載體的自我復(fù)制性質(zhì)。將重組后的載體引入到宿主細(xì)胞中,并在宿主細(xì)胞中大量繁殖。常見(jiàn)的載體有質(zhì)粒,噬菌粒,酵母人工染色體。

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  • 更新時(shí)間:2024-08-29
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詳細(xì)介紹

克隆載體(Cloning Vector):通常采用從病毒、質(zhì)?;蚋叩壬锛?xì)胞中獲取的DNA作為克隆載體,在載體上插入合適大小的外源DNA,并注意不能破壞載體的自我復(fù)制性質(zhì)。將重組后的載體引入到宿主細(xì)胞中,并在宿主細(xì)胞中大量繁殖。常見(jiàn)的載體有質(zhì)粒,噬菌粒,酵母人工染色體。

 

  對(duì)載體的要求:①能在宿主細(xì)胞中復(fù)制繁殖,而且要有較高的自主復(fù)制能力。

 

 ?、谌菀走M(jìn)入宿主細(xì)胞,而且進(jìn)入效率越高越好。

 

 ?、廴菀撞迦胪鈦?lái)核酸片段,插入后不影響其進(jìn)入宿主細(xì)胞和在細(xì)胞中的復(fù)制。這就要求載體DNA上要有合適的限制性核酸內(nèi)切酶位點(diǎn)。

 

 ?、苋菀讖乃拗骷?xì)胞中分離純化出來(lái), 這才便于重組操作。

 

 ?、萦腥菀妆蛔R(shí)別篩選的標(biāo)志,當(dāng)其進(jìn)入宿主細(xì)胞、或攜帶著外來(lái)的核酸序列進(jìn)入宿主細(xì)胞都能容易被辨認(rèn)和分離出來(lái)。這才介于克隆操作

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